小分子RNA（miRNA）预测Luminal A型乳腺癌早期和后期复发及复发机制的研究

Luminal A is the most common subtype in breast cancer featuring Estrogen Receptor(ER)or Progesterone Receptor(PR)positive, Her-2 negative. Currently five years of endocrine therapy is the standard adjuvant treatment for this subtype. However, one-thirds of the patients will relapse either during endocrine therapy(early recurrence)or after the end of endocrine therapy(late recurrence) with equal relapse rate. Unfortunately, the biological differences between these two types of recurrences and the underlying mechanism of late recurrence have never been addressed before. MicroRNA(miRNA)plays a very important role in modultion of multiple genes and is closely related to carcinogenesis and cancer progression. Thus, we postulate that by detecting the differences of miRNA expresssion between early and late recurrence, and furthur exploring the function of target genes of these miRNA will help to predict the relapse risk and elucidate the mechanism of recurrence which will probably guide the clinical management of Luminal A breast cancer and lead to potential new treatment targets.

Luminal A型是乳腺癌中最常见的亚型。表现为激素受体ER或PR阳性、Her-2阴性。目前这类乳腺癌术后标准的辅助内分泌治疗为5年。但仍有30%左右患者复发，分为内分泌治疗期间复发（早期复发）和内分泌治疗结束后复发（后期复发）。推测两者之间存在着生物学驱动力的差异。但是一直以来缺乏针对两者在生物学特性上的差异，以及后期复发可能机制的研究。肿瘤的发展是多基因作用的结果，小分子RNA（miRNA）能调控多个基因的表达，与肿瘤的发生发展有着密切的联系。因此，本研究计划比较早期复发和后期复发的Luminal A型乳腺癌在miRNA表达上的差异，并且对差异miRNA所对应的靶基因进行表达和功能的验证，旨在发现复发，尤其是后期复发的预测指标，揭示导致早期复发和后期复发的生物学机制及两者的差异，以期指导Luminal A型乳腺癌的临床治疗。

乳腺癌的复发高峰集中在术后2-3年，HER2阴性Luminal型乳腺癌有别于其他类型乳腺癌，其一半的复发在5年内分泌治疗结束后（远期复发）。我们推测复发与不复发，复发时间不同的患者，其临床特点及生物学驱动力方面必然存在差异。. 我们收集2003年至2009年在中国医学科学院肿瘤医院就诊复发转移的乳腺癌患者 HER2阴性Luminal型乳腺癌390例，比较近期复发与远期复发患者临床病理特征，发现合并脉管瘤栓、淋巴结转移 ≥ 4个的比例在近期复发中更高。而激素双受体阳性者、内分泌治疗不规范者则在远期复发中更常见。在远期复发组首发肺转移所占比例高达47.7%，具有一定的器官特异性（P < 0.001）。而其中位复发后总生存（OS）为66个月，明显长于近期复发组的39个月（HR:1.62,P = 0.003）。. 同时我们从中选取TNM平衡后的患者术后的石蜡组织标本15例，其中术后5年以内复发者（近期复发）5例，术后5-10年间复发者5例，术后10年以上未复发者5例。对标本进行Affymetrix miRNA 4.0芯片杂交，SAM法分析差异表达的miRNA。随后通过实时定量PCR（qRT-PCR）对这三组患者部分差异表达的miRNA进行验证。结果发现，近期复发与未复发组患者比较，miR150-3p显著下调（P = 0.022）；远期复发患者与未复发患者相较，miR150-3p,miR494-3p显著下调（P = 0.0016 ; P < 0.01）,复发组与未复发组相较，miR150-3p,miR494-3p均显著下调（P 值均 < 0.01），与芯片结果相一致。研究提示复发与未复发的乳腺癌患者存在miRNA的差异表达，特别是miR150-3p对乳腺癌的复发的预测可能具有时间依赖性，即可以预测10年以内的复发，为后续大规模验证及靶基因功能学研究提供了工作基础。