基于细胞自噬Atg12/LC3结合系统的补肾柔肝法干预骨性关节炎软骨潮线漂移的机制研究

潮线位于关节软骨放射层与钙化层的连接部，潮线漂移是骨性关节炎进程中重要的病理变化，软骨细胞自噬调控机制失衡是影响软骨潮线漂移的重要因素，而Atg12/LC3结合系统在细胞自噬泡形成过程中发挥重要的调节作用。课题组前期研究发现补肾柔肝法能干预软骨潮线漂移、改善软骨下骨重塑、延缓软骨退变，提示调节软骨细胞自噬可能是防治骨性关节炎的一个重要机制，故本研究以软骨细胞自噬为切入点，以大鼠骨性关节炎的动物模型和细胞模型为研究对象，采用Real-time PCR、Western blot、免疫组化等技术，观察以补肾柔肝为主的透骨消痛胶囊对软骨细胞自噬Atg12/LC3结合系统关键调控因子Beclin1、Atg3、Atg5、Atg7、Atg10、Atg12、LC3-I、LC3-II mRNA 及蛋白表达的影响，探讨补肾柔肝法对软骨潮线漂移的调节作用，为补肾柔肝法防治骨性关节炎的临床应用提供实验基础。

为了探讨补肾柔肝法通过调节软骨细胞自噬Atg12/LC3结合系统干预骨关节炎软骨潮线漂移的作用机制，本研究以大鼠骨关节炎的动物模型和细胞模型为研究对象，采用RT-PCR、Western blot、免疫组化等技术，观察以补肾柔肝为主的透骨消痛胶囊对骨关节炎软骨潮线漂移与软骨细胞自噬Atg12/LC3结合系统关键调控因子表达的影响，结果显示，（1）透骨消痛胶囊通过降低软骨基质成分蛋白多糖的丢失，改善软骨与软骨下骨的胶原纤维排列、软骨潮线的漂移，从而抑制软骨基质稳态失衡，延缓软骨退变；（2）透骨消痛胶囊通过上调LC3 II/I、 ULK1与Beclin1表达，促进软骨细胞自噬，提高软骨细胞生存能力，抑制软骨基质稳态失衡，从而调节软骨潮线漂移，保护软骨；（3）透骨消痛胶囊通过上调Atg12/LC3结合系统的关键调控因子Beclin1、Atg3、Atg5、Atg7、Atg10、Atg12与LC3 II/I 表达与细胞内自噬体的形成，促进软骨细胞自噬。本研究初步探讨了补肾柔肝法通过调节软骨细胞自噬干预骨关节炎软骨潮线漂移的作用机制，同时，研究结果也提示促进软骨细胞自噬，能抑制软骨基质的稳态失衡，为深入研究补肾柔肝法抑制骨关节炎筋骨失养的作用靶点提供新思路。本研究发表学术论文7篇，其中SCI论文2篇。