补肾活血中药纳米微球对骨性关节炎软骨病变RNA结合蛋白HUR调控机制的干预研究

In Osteoarthritis(OA),various pathological factors cartilage cells make dynamic balance system of synthesis and degradation of cartilage matrix degradation imbalance,inclined to thedirection,ultimately lead to the destruction of cartilage matrix. The study showed that the RNA binding protein HUR is involved in TGF-β,XIAP post transcriptional gene regulation.The Chinese medicine which Tonify the kidney and activate blood circulation does have a promotion on the OA proliferation and repair of cartilage. This study on the complex nanoparticles,which constructed by Tonifying the kidney and activating blood circulation,chitosan,sodium alginate, concentrates on the post-transcriptional regulatory mechanisms of gene expression of cartilage signaling pathways, realizing how to regulate the expression of TGF-β,XIAP mNRA in Study of cartilage cells in vitro,in the meantime, among the models of OA in rats by injection of collagenase,using the HuR in treatment of the transgenic transplantation of mesenchymal stem cells in vivo study,knows how to control the TGF-β,XIAP up regulation of mNRA expression, inhibit inflammatory immune micro environment,promote TGF-beta/smads pathway in regulating the proliferation and repair of cartilag.

在骨性关节炎(OA)时，各种病理因素作用于软骨细胞，使软骨基质合成与降解的动态平衡体系失衡，向降解方向倾斜，最终导致软骨基质的破坏。目前研究表明RNA结合蛋白HUR参与调节TGF-β、XIAP基因转录后调节，补肾活血中药对关节炎增殖与修复有促进作用。本项研究以补肾活血中药、壳聚糖、海藻酸钠构建复合体纳米微球，从软骨信号通路基因表达的转录后调节机制切入研究，采用软骨细胞系体外研究补肾活血中药微球如何通过HuR调控转录后TGF-β、XIAP mNRA表达；同时采用胶原酶注射OA大鼠模型，利用HuR转基因间充质干细胞移植治疗，体内研究补肾活血中药微球如何通过HuR控制TGF-β、XIAP mNRA表达上调，诱导炎症免疫微环境抑制，促进TGF-β/smads通路激活调控软骨增殖与修复。

膝骨关节炎（KOA）是临床上常见的老年退变性疾病，发病率高，是中老年人中活动受限和关节疼痛的主要原因，给中老年人中体力活动带来不便和障碍，给患者和家属生活质量带来严重影响。KOA 的病理过程以软骨基质的降解和软骨退变为特征，以软骨细胞功能的改变为关键。其中，关节软骨细胞凋亡是 OA 发病的重要原因和致病机制。XIAP（x-Link apoptosis inhibitory protein）是凋亡抑制蛋白家族（inhibitor of apoptosis proteins，IAPs）中的一员，是细胞凋亡调控的重要节点。有学者进一步研究发现[4]，RNA结合蛋白HuR能结合XIAP mRNA的上的内部核糖体进入位点（internal ribosome entry site，IRES），提高XIAP mRNA的稳定性，从而增强XIAP的抗凋亡作用的发挥。基于此，课题组应用龙鳖胶囊进行干预，通过在体及离体实验，探索HuR、XIAP、软骨细胞凋亡、龙鳖胶囊之间的相互作用及关系，所得结论如下：1）HuR可促进BMSCs的成软骨分化；2）HuR可延缓KOA中软骨的退变；3）补肾活血中药龙鳖胶囊可通过上调HuR以及XIAP表达，减少软骨细胞的凋亡；4）补肾活血中药龙鳖胶囊可以促进II型胶原的分泌，促进软骨修复，从而延缓软骨退变。本研究对HuR调控软骨细胞分化、抗凋亡情况进行了初步的探索，为后续深入的研究提供了思路；对补肾活血方龙鳖胶囊进行研究，针对其对延缓KOA软骨退变的机制进行了探讨，为研究中医药干预KOA提供了进一步的研究方向。