人参总皂苷在K562细胞EpoR介导的信号转导中对STAT的调控

本项目研究人参总皂苷（TSPG）促进髓系白血病K562细胞向红系血细胞分化的机制。针对"TSPG在EpoR介导的信号转导中对STAT如何调控"这一重要环节，研究STAT分别在细胞浆、细胞核和全细胞中的分布、表达与功能变化等。应用RT-PCR、Western blot、免疫沉淀、电泳带移动阻滞实验、抗体胶移动实验等多种技术手段，从分子水平阐述祖国医学"补气生血"的理论，为TSPG促进K562细胞的分化和研制开发诱导白血病分化的天然中药剂提供理论与实验依据。同时为中医药现代化并与国际接轨奠定基础。

目前白血病的治疗仍主要采用对正常机体免疫与造血系统有极大损害的传统大剂量联合化疗。因此，从祖国医学宝库中寻找抑制白血病细胞恶性增殖并诱导其向成熟方向分化的中药诱导剂是值得探索的途径。本项目的主要目的是研究人参总皂苷（TSPG）促进髓系白血病K562细胞向红系血细胞分化的机制，聚焦于“TSPG在EpoR介导的信号转导中如何调控STAT”这一重要环节，涉及对STAT家族成员的筛选（STAT5、STAT3和/或STAT1），STAT在细胞浆、细胞核和全细胞中的分布、表达与功能变化等，为TSPG促进K562细胞的分化造血调控提供理论依据。通过三年的努力钻研，我们已完成此项目。我们的研究结果表明：1. TSPG及其单体Rg1可抑制髓系白血病细胞K562的增殖并诱导其向红系细胞转化。促进K562细胞分化的最佳剂量分别为TSPG200 mg／L，Rg1 20μmol/L 。2. TSPG及其单体Rg1在K562细胞向红系细胞分化过程中促进STAT5蛋白从细胞核向细胞浆转出，使STAT5蛋白胞浆、胞核表达和分布改变；促进STAT5蛋白酪氨酸磷酸化减弱，使STAT5蛋白活性改变。3. TSPG另一重要单体Rb1可抑制髓系白血病细胞K562的增殖；在Rb1抑制K562细胞增殖的信号转导过程中， JAK2和JAK2酪氨酸磷酸化增强，而STAT5的酪氨酸磷酸化减弱。4. TSPG及其单体Rg1作用K562过程中，能减少K562细胞核中STAT3的表达和诱导STAT3由胞核向胞浆内转移。5. TSPG及其单体Rg1在K562细胞向红系细胞分化过程中促进STAT1蛋白从细胞核向细胞浆转出，使STAT5蛋白胞浆、胞核表达和分布改变；6.从诱导K562分化和对STAT的调控影响角度对比，我们发现，单体Rg1的效果比TSPG更好。