丝裂原活化蛋白激酶在σ氨基酮戊酸-光动力治疗皮肤鳞状细胞癌中的作用及机制研究

皮肤鳞状细胞癌（SCC）是人类最常见的恶性肿瘤，发病率逐年上升。ALA-PDT是一种很有前景的皮肤肿瘤的治疗办法，但目前对某些SCC的疗效不够理想。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）与肿瘤的发生与凋亡密切相关，在肿瘤的放疗和化疗中起重要作用，PDT能激活MAPKs，但MAPKs不同家族成员在不同分化程度的皮肤SCC中的表达是否存在差异、这种差异是否介导了ALA-PDT治疗SCC的效果，以及MAPK在ALA-PDT治疗SCC中的作用尚不清楚。本研究运用RT-PCR、免疫组化、蛋白质印迹、免疫细胞化学及MTT等技术，通过检测MAPK在不同分化程度的SCC中的表达以及ALA-PDT治疗人类皮肤SCC和SCL-1细胞前后MAPK信号通路的改变和细胞凋亡情况，以明确MAPK在ALA-PDT治疗皮肤鳞癌中的作用及机制，为ALA-PDT治疗方法针对性高效应用及其增效研究提供理论依据。

皮肤鳞状细胞癌（SCC）是我科的常见病，大部分发生在皮肤的暴露部位，严重威胁着人类健康。传统治疗手段如外科切除、冷冻等易造成疤痕,影响患者的美观需求以及生活质量。δ氨基酮戊酸-光动力疗法(ALA-PDT)作为一种新的肿瘤治疗方法近年来倍受重视，但对皮肤鳞癌的疗效尚不确定。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）是MAPK信号通路的枢纽，介导细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程，已有研究发现MAPK信号通路在肿瘤的放疗和化疗中起着重要作用，但在ALA-PDT治疗皮肤鳞癌中的作用及机制尚不清楚。为了明确MAPK家族成员在不同分化程度皮肤SCC中的表达以及MAPK信号通路在ALA-PDT治疗皮肤鳞癌中的作用，本研究观察了ALA-PDT对不同分化程度的皮肤SCC的治疗效果；运用免疫组织化学方法检测了这些组织中磷酸化的ERK1/2、JNK和p38的表达情况，分析这些信号转导分子在皮肤鳞癌中的表达与临床浸润深度、病理分级的关系；同时在体外建立ALA-PDT诱导皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞凋亡的模型，运用电子显微镜、MTT(噻唑蓝) 酶联免疫法、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术、细胞免疫荧光化学和Western-blot法检测了ALA-PDT对SCL-1的凋亡作用以及MAPK家族成员（MEK、ERK1/2、Elk-1、P38、JNK和c-Jun）在ALA-PDT破坏SCL-1细胞前后的表达状态；通过MAPK抑制剂的干预，研究了MAPK信号通路在ALA-PDT破坏SCL-1细胞、诱导细胞凋亡中的作用及机制。我们的研究结果显示：①ALA-PDT能够治疗皮肤鳞癌，但治疗效果还不够理想；②皮肤鳞癌的发生与MAPK信号通路有关；③ ALA-PDT能够诱导SCL-1细胞的凋亡，但其凋亡效果不够理想；④ALA-PDT后ERK1/2、P38和JNK信号通路被激活，阻断信号通路后能够增强ALA-PDT对SCL-1细胞的杀伤作用。本项目的研究结果提示ERK1/2、P38和JNK信号通路可能成为光动力治疗皮肤鳞癌增效研究的新靶点。