NLR2/RICK通路和负调控蛋白Erbin在针刺足三里治疗创伤脓毒症中的作用

脓毒症是重症医学领域常见的严重临床综合征和治疗难题，我们前期研究表明针刺足三里对严重烫伤大鼠具有保护作用，其机制可能是激活α7nAChRs胆碱能抗炎通路，从而抑制机体全身性炎性反应。本课题拟通过20%总体表面积III度烫伤，静脉注射胞壁酰二肽/MDP建立大鼠创伤脓毒症模型，构建Erbin siRNA表达载体，转染RAW264.7单核巨噬细胞，体内外观察α7nAChRs特异激动剂处理RAW264.7单核巨噬细胞和针刺足三里后脓毒症大鼠肝肺脏Erbin蛋白和α7nAChRs免疫定位，NLR2和蛋白激酶RICK表达、核因子κB 活化、以及TNF-α、IFN-γ和HMGB1水平，探讨足三里刺激治疗创伤脓毒症的分子作用机制，为针刺足三里治疗脓毒症提供新的理论依据。

脓毒症是重症医学领域常见的严重临床综合征和治疗难题，本课题在前期研究的基础上，进一步证实电针足三里激活胆碱能抗炎通路，改善严重烫伤后大鼠的凝血功能状态，降低血浆促炎性细胞因子水平。通过MDP刺激RAW264.7细胞使其产生炎性反应，结果发现GTS-21能够激活胆碱能抗炎通路抑制MDP诱导的炎症反应，可能是通过抑制NLR2/RICK通路信号转导而实现的。另外，通过MDP离体刺激RAW264.7细胞，观察GTS-21处理后，RNA干扰技术抑制Erbin基因后的NF-κB活化、Erbin表达、以及TNF-α、IFN-γ水平。结果发现Erbin蛋白是胆碱能抗炎通路抑制MDP诱导的炎症反应中关键调控蛋白，在细胞内信号通路中起负调控作用。利用胞壁酰二肽（Muramyl dipeptide，MDP）静脉注入20％总体表面积Ⅲ度烫伤大鼠体内，建立了烫伤后脓毒症模型，并且进一步发现电刺足三里可减轻烫伤复合MDP导致的大鼠急性肝脏和肺脏损伤，其机制可能与激活胆碱能抗炎通路，抑制NLR2/RICK信号通路，下调血清炎性细胞因子TNF-α和HMGB1的含量有关，为针刺足三里治疗脓毒症提供了新的理论依据。