出生早期甲状腺素注入对胎儿酒精效果大鼠脑发育的影响

China has great power of producing and consuming alcohol, therefore maternal alcohol abuse already became one of the most prominent causes of mental retardation in the offspring.Thyroid hormones exert an important role on the development of central nervous system(CNS).Many studies indicated a strong correlation between the low maternal thyroid hormone status caused by alcohol and offspring injury of CNS.Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and its functional receptor tyrosine kinase receptor B(TrkB) are widely expressed in CNS,and has important effect in neuronal survival,growth and differentiation.This study will be divided into five groups:alcohol group,control group,alcohol+low thyroxine group,alcohol+medium thyroxine group and alcohol+high thyroxine group.The cerebral cortex and cerebellum in the pups of five model groups is the main object of this study,the features and distribution of BDNF- and TrkB-containing neuron in the different ages of different parts of brain will be assayed using immunohistochemical techniques and the protein and mRNA of BDNF in the different ages of brain will be measured via Western Blotting and RT-PCR,to reveal the effects of fetal alcohol effects(FAE) in different parts of rat brain development and the relation between FAE and early exogenous thyroxine,to provide a theoretical basis in the prevention and treatment of FAE of brain damage.

中国是酒精生产和消耗大国，孕期饮酒已成为引起其后代精神发育迟缓的最常见原因。甲状腺素在中枢神经系统发育过程中起重要作用。很多研究已表明，饮酒所导致的母体低甲状腺素状态与其后代中枢神经系统损伤有密切关系。脑源性神经营养因子和其功能性受体酪氨酸激酶受体B 广泛分布于中枢神经系统，对神经元的生存、生长、分化有重要的影响。本研究将制作酒精组、正常组、酒精+低剂量甲状腺素组、酒精+中剂量甲状腺素组，酒精+高剂量甲状腺素组等5组实验组，以出生后不同时期的大脑和小脑组织为主要研究对象，采用免疫组化法，分析含有脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶受体B神经细胞的形态和分布特点；还将采用RT-PCR法及Western Blotting法测定不同时期脑组织中脑源性神经营养因子的mRNA和蛋白表达水平，深入研究胎儿酒精效果与出生早期不同剂量外源性甲状腺素的相关关系，为防治胎儿酒精效果引起的脑损伤提供理论依据。

目前，女性饮酒及酒精成瘾比率正快速增长，孕期饮酒已成为引起其后代精神发育迟缓的最常见原因。甲状腺素在中枢神经系统发育过程中起重要作用。研究目的：揭示胎儿酒精效果对大鼠不同部位脑发育的影响及与出生后不同剂量外源性甲状腺素的相关关系。研究结果：1）酒精组子鼠出生后不同时期体重均低于正常组，酒精+中剂量甲状腺素组体重类似于正常组，均较酒精组显著差异；酒精+小剂量甲状腺素组和酒精+大剂量甲状腺素组出生早期体重均低于正常组，且较酒精组无显著差异；2）出生早期三组酒精+外甲状腺素组血液中甲状腺素含量均高于酒精组，出生后28天时及之后较正常组无显著差异；3）在小脑皮层中，酒精+中剂量和大剂量甲状腺素组子鼠P14开始出现分布及形态与正常组类似的，具有长而明显突起的，基本单层排列的，成熟的含有BDNF和TrkB的浦肯野细胞，但酒精组和酒精+T2.5组子鼠始终未出现完全单层排列的成熟的含有BDNF和TrkB的浦肯野细胞，P28时及之后酒精组子鼠中含BDNF和TrkB的浦肯野细胞数明显减少；在大脑皮质中，酒精+T5.0组及酒精+T7.5组子鼠P7时始出现具有长而明显突起的、成熟的含有BDNF和TrkB的神经元，但酒精+T7.5组子鼠出生后P7到P21时含有BDNF和TrkB的神经元的数量明显少于正常组及酒精+T5.0组；酒精组及酒精+T2.5组子鼠始终未出长而明显突起的、成熟的含有BDNF和TrkB的神经元。4）酒精组和酒精+低剂量甲状腺组仔鼠大脑中BDNF蛋白量在出生后各年龄段均较正常组显著较少，酒精+中剂量甲状腺组和酒精+高剂量甲状腺组仔鼠大脑中BDNF蛋白量在P14及此以后日龄中均较酒精组显著增多，与正常组比较无显著性差异；5)酒精组和酒精+低剂量甲状腺组仔鼠脑组织中BDNF mRNA相对量在出生后14天及之后各年龄段均低于正常组，酒精+中剂量甲状腺组出生后年龄段均较酒精组显著增多，酒精+高剂量甲状腺组仔鼠大脑中BDNF mRNA相对量除P7外均较酒精组显著差异。研究提示不同剂量外源性甲状腺素均能促进大脑皮层，海马及小脑中BDNF 和其特异性受体TrkB 的合成，促进BDNF-及TrkB-阳性神经细胞的发育，进而能够改善胎儿酒精效果等低甲状腺素所引起的脑发育障碍，中剂量外源性甲状腺素对胎儿酒精效果脑损伤的改善作用较小剂量和大剂量明显,研究结果为防治胎儿酒精效果脑损伤提供理论依据。