宫内缺氧对胎儿出生后肝纤维化的影响

众所周知，肝纤维化的进一步发展即为肝硬化，而肝硬化与肝癌的发生有着密切关系，在肝硬化中发生肝癌的比例为15%-25%，特别是在我国，肝癌合并肝硬化高达85%左右。犹如妊娠期营养不良及母体使用类固醇类药物分别可以对胎儿心血管系统和内分泌系统产生重构效应，在细胞和分子水平留下"印记"，进而在出生后使得高血压和Ⅱ型糖尿病发病危险显著升高，诸如缺氧等孕期不良因素也可能对肝细胞产生重要的和持久性的影响。这种影响可以成为出生后肝病发生的胎源性基础。本研究将从细胞分子、基因调控、表观遗传学的角度去分析胎儿宫内缺氧与肝脏发育不良之间的关系，非正常发育的肝组织很可能是出生后肝纤维化的胎源性病理基础，研究结果可为早期预防和干预与肝纤维化有关的疾病，提供新的思路和手段。

本课题主要研究宫内缺氧对子代肝脏生长发育的影响以及子代肝纤维化易感性的影响，通过建立体外培养肝星形细胞模拟体内缺氧环境进一步了解其机制和意义。课题将大鼠从妊娠第4天至第20天，放入缺氧环境饲养（O2浓度10±0.5%），建立大鼠宫内缺氧模型。分别检测缺氧组和对照组中胎鼠血气及血液离子指标；体重、肝脏重量等，检测两组样品的血清生化指标；HE染色后光镜下观察肝组织病理改变；Western-blot法检测肝组织缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1, HIF-1α）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）蛋白的表达；取子代雄性大鼠给予CCl4 刺激来造成肝损伤，对其进行血气分析和肝功能检测，肝组织HE和Masson染色，Western-blot检测蛋白表达。体外缺氧条件下培养肝星形细胞，并进行流式仪分析细胞周期，Western-blot检测HIF-1α和TGF-β1蛋白表达。本题的实验结果显示，在低氧环境刺激胎鼠肝脏组织中HIF-1α的表达水平上调，激活了HIF-1α蛋白通路，导致机体内炎症因子TNF-α和IL-6的分泌增加，启动了子代肝脏发生炎症反应，体外实验结果也表明缺氧促进肝星形细胞的活化。在宫内缺氧导致的肝脏生长发育非正常代谢的模式下采用CCl4二次打击，缺氧子代大鼠（6月龄）形成肝纤维化周期缩短，增加了子代大鼠（6月龄）肝纤维化的易感性。