recF在γ射线致耐辐射奇球菌DNA损伤重组修复中的作用研究

耐辐射奇球菌(Dr)具有极强的辐射抗性,同源重组修复被认为是其DNA损伤修复的主要途径。本实验室前期研究发现，Dr菌重组修复途径中的recF基因mRNA水平随着辐照剂量的增大，其表达也逐渐增强，基于辐照剂量增加导致DNA断裂损伤增加的研究共识，我们推测，recF基因可能在Dr菌辐照损伤的同源重组修复途径中起非常重要的作用。据此，课题组拟构建Dr菌重组修复基因recF缺陷突变株,研究其辐射抗性的变化,通过二维凝胶差异分析技术，分析突变株和野生株辐照后蛋白表达差异，对差异表达蛋白进行生物信息学分析，探讨recF在Dr菌DNA损伤修复中的作用;同时，构建Dr菌RecF高效蛋白表达体系,通过体外实验验证RecF蛋白对辐射致DNA链断裂的防护及修复作用。研究结果将揭示recF基因及蛋白在Dr菌辐射抗性机制中的作用,为今后抗辐射方法的建立，修复辐射污染环境基因工程菌的构建等打下基础。