艾燃烧生成物对SAM小鼠学习记忆行为及MAPK通路的影响

灸疗是中医学的主流疗法之一，对许多疾病都有较好的疗效，尤其在抗衰老方面优势显著。既往研究认为艾灸作用环节中主要存在温热刺激、光辐射、药物介入等因素，对艾燃烧生成物即艾烟在艾灸疗法中的效应机制研究较少。艾燃烧生成物可通过局部皮肤及呼吸道为人体吸收，故其亦可能是艾灸效应的关键因素。疾病的发生、发展和治疗均与机体信号转导密切相关，因此加深对信号转导的认识，有助于在分子水平上认识和治疗疾病。衰老状态下机体信号转导的改变，直接或间接地对机体产生多方面的影响。MAPK通路是真核生物细胞内重要的信号转导通路，SAM小鼠是目前研究衰老与抗衰老较为成熟的动物模型，SAMp/8小鼠又以学习记忆功能障碍为主要病理型。故本课题拟从艾燃烧生成物切入，观察其对SAM小鼠学习记忆行为学及海马组织MAPK通路中3个主要亚族ERK、p38 MAPK和JNK的活性变化的影响，以期从分子水平上阐释艾燃烧生成物在艾灸中的作用机制

本课题首先以快速老化模型小鼠为实验动物，探讨艾烟的抗衰老作用及其MAPK通路作用机制。采用2×3析因设计，以浓度和时间为两因素，将SAMP8小鼠随机分为6个艾烟干预组：低浓度15min组，低浓度30min组，中浓度15min组，中浓度30min组，高浓度15min组，高浓度30min组），另设SAMP8模型对照和SAMR1正常对照。6个艾烟干预组分别用相应浓度和时间的艾烟熏灸4周，模型组和正常组不用艾烟干预。通过观察艾烟干预前后小鼠学习记忆行为学的变化、神经免疫功能指标（神经递质含量、抗氧化酶含量及th1/th2细胞因子水平）的变化，探讨艾烟是否具有抗衰老作用；通过观察艾烟干预前后小鼠海马组织中ERK、p38 MAPK和JNK的活性变化，探讨艾烟的抗衰老作用是否与MAPK通路有关。.　　　继而以嗅觉障碍模型小鼠为实验动物，探讨艾烟是否通过嗅觉通路起作用。将昆明小鼠随机分为空白组、艾熏组、假手术组、模型组和模型艾熏组。模型组和模型艾熏组采用硫酸锌滴鼻的方法造嗅觉障碍动物模型，假手术组采用蒸馏水滴鼻。以中浓度20min的艾烟干预条件对艾熏组和模型艾熏组进行为期4周的熏灸，其余各组只进行相同的抓取。通过观察行为学及神经免疫功能的变化探讨嗅觉通路是否是艾烟作用途径。.　　　结果发现：.（1）一定浓度的艾烟干预具有抗衰老的作用。与模型组相比，艾烟各组神经递质、抗氧化酶及细胞因子等各项指标的结果或优于模型组，或与模型组无差异，提示艾烟干预不会加重SAMP8小鼠的衰老进程，一定浓度和时间干预的艾烟可以通过提高胆碱类和单胺类神经递质的含量，降低氨基酸类神经递质的神经毒性作用，提高抗氧化损伤能力、调整Th1/Th2细胞因子的偏移状态等起到抗衰老作用。析因分析显示，艾烟干预的适宜参数因指标的不同而有所变化：对提高单胺类神经递质含量而言，艾烟的适宜干预参数为中浓度15min；对提高抗氧化能力而言，艾烟的适宜干预参数为中浓度15min或30min；对调整Th1/Th2细胞因子的偏移而言，艾烟的适宜干预参数为中浓度。.（2）艾烟的抗衰老作用与MAPK通路有关。模型组小鼠海马ERK、P38、JNK的灰度值显著高于正常组，艾烟干预各组小鼠海马P38、ERK、JNK的灰度值均显著低于模型组，提示艾烟干预可通过MAPK通路起作用。析因分析显示，艾烟的适宜干预参数为低浓度30min。.（3）避暗