水杨酸盐致耳鸣的中枢可塑性作用机制研究

临床上长期服用阿司匹林（水杨酸盐）可致耳鸣，本项目组前期实验研究发现水杨酸盐引起OHC电能动性增强，进而导致耳蜗神经电生理活动增强，增强的电生理活动上传是否导致听觉中枢功能活动的增强或出现听觉中枢可塑性改变备受关注。本研究拟按照经典方法建立长期注射水杨酸盐诱导耳鸣的动物模型，并用动物行为学和电生理学方法来验证动物是否存在耳鸣。采用microPET技术评估听觉各级中枢功能活动，通过动态同步观察长期注射水杨酸盐过程中和停止注射后ASECA的变化、听觉各级中枢功能活动的改变与动物行为学（出现耳鸣）在时间相位上的对应关系，明确听觉中枢功能活动的改变在耳鸣产生机制中的作用。采用透射电镜和分子生物学等方法，了解听觉中枢相应的超微结构和NMDA受体、c-fos和arg3.1的mRNA及蛋白的表达，阐明耳鸣听觉中枢可塑性(耳鸣的中枢化)的形成机制，为耳鸣产生的病理生理机制以及耳鸣临床干预治疗提供理论依据。

临床上长期服用阿司匹林（水杨酸盐）可致耳鸣，本项目组前期实验研究发现水杨酸盐引起OHC电能动性增强，进而导致耳蜗神经电生理活动增强，那么，活动上传是否导致听觉中枢功能活动的增强和/或出现听觉中枢可塑性改变值得经一步研究。.项目主要研究方向：水杨酸盐致耳鸣的中枢可塑性作用机制.（1）建立惊跳反射刺激前抑制（GPIAS）方法检测大鼠耳鸣行为，并结合电生理学方法来验证动物是否存在耳鸣。采用microPET技术评估听觉各级中枢功能活动，发现水杨酸盐引起的耳鸣使得下丘、听皮层及海马出现活跃及代谢增高现象。.（2）研究观察到耳鸣大鼠耳蜗背核、下丘及听皮层超微结构中，突触数量明显增加，突触前膜囊泡增多，显示突触活动亢进。许多突触形态由平型变成凹型或U型，突触界面曲率增加，突触间隙明显增宽，突触后膜致密物质厚度增加。同样也观察到海马的突触前膜囊泡增多，突触界面曲率增加，突触后膜致密物质厚度增加，表明神经元发生可塑性的改变表现在突触超微解剖结构上，为耳鸣中枢可塑性机制提供了解剖结构上的实验依据。.（3）检测到耳鸣大鼠耳蜗背核、下丘和听皮层中NR2B、Egr-1和Arg3.1的mRNA及其蛋白表达的特异性改变，在海马部位NR2B和Egr-1基因表达呈现可逆性上调规律。因此，突触超微结构可能通过即刻早期基因和NR2B受体的调节来改变。，表明耳蜗背核、下丘、听皮层和海马部位神经元发生了不同程度的可塑性改变，且和耳鸣电生理检测指标变化相一致。推测听觉中枢和海马活动参与了耳鸣中枢可塑性的形成机制。.（4）研究还发现耳鸣大鼠产生与海马功能相关的抑郁样行为。推测海马突触超微结构及可塑性相关蛋白的改变诱发动物情绪改变，并与耳鸣共同导致了抑郁样行为的产生。抑郁样行为与耳鸣互相影响及促成，可能是耳鸣产生的中枢可塑性机制之一。. 结论及意义：耳鸣产生机制可理解为外界因素（水杨酸盐）致外毛细胞能动性增加，继而使蜗神经纤维同步自发活动增强，活动增强的刺激可导致与神经元突触可塑性相关的神经递质和基因表达的改变，表现在突触超微解剖结构上的改变，产生听觉中枢及海马的可塑性，并出现活跃及代谢增高现象，这些活动的改变在听觉中枢通路及海马中整合后被感觉（错误的编码）为一种声音，即耳鸣。这无疑对今后耳鸣的实验研究和临床治疗干预（包括药物、声掩蔽、行为认知疗法、电刺激以及和改变中枢可塑性相关方式）有着极其重要的指导意义。