针刺启动癫痫大鼠海马神经-免疫保护机制的经穴效应特异性研究

specificity of acupoint effects plays an important role in clinical efficacy of acupuncture, our previous research results showed objective existence of acupoint effects,which was named ‘a study on gene expression profile of migraine treated by acupoints on ill meridian’.The study about neuroimmune system protection mechanism of epileptic rat’ hippocampus activited by acupuncture will follow principle of traditional acupuncture dialectical therapy , different function state of epileptic rat will be treated by the same acupoints and epileptic rat at the same function state will be treated by different acupoints ,which one plays therapeutic action in epilepsy and the other that has no therapeutical effect on epilepsy acording to ancient and modern documents. Microcosmic and quantitative method such as chip technology combining science of acupuncture and moxibustion, molecular bioinformatics and computer science will be used to observe differential expression of pathomorphology, cell apoptosis and cell factor in hippocampus tissue of cpileptic rat before and after getting acupuncture treatment. The hypothesis will be verified about specificity of acupoint effects being multilevel and targeted in this research. the study could provide reliable experimental evidence for the biological basis of acupoint effect.

经穴效应的特异性是针灸发挥临床疗效的关键因素，在前期研究（国家自然科学基金 “本经取穴调控偏头痛患者相关基因表达谱的研究”）结果肯定经穴效应存在的基础上，遵循针灸辩证施治原则，以癫痫模型大鼠为疾病研究载体，从经穴启动癫痫大鼠海马神经-免疫保护机制入手，以相同经穴作用于大鼠不同机能状态为切入点，筛选古今文献中有癫痫治疗作用的经穴为针灸治疗处方和无癫痫治疗作用的经穴为对照处方，以高通量、高效率的芯片技术等微观定量方法为主要技术手段，整合针灸学、分子信息学、生物信息学、计算机科学等多种技术，密切围绕“经穴效应的特异性是通过多水平的靶向综合调节实现的”的研究假说，整体、系统观察针刺前后癫痫大鼠海马组织的病理形态学变化、细胞凋亡情况及细胞因子表达差异，揭示经穴效应的启动机制，从靶器官的响应角度阐释经穴效应（双向调节作用）的特异性体现，为揭示经穴效应的生物学基础提供切实可靠的实验依据。

本项目以健康和疾病两种不同机能状态大鼠为研究载体，从经穴启动癫痫疾病大鼠海马神经-免疫保护机制入手，选用古今文献记载对癫痫疾病具有治疗作用的百会、大椎、足三里单穴和组穴为治疗处方，以及无治疗作用的外关、环跳、手三里为对照处方，揭示不同经穴在大鼠不同机能状态下对同一靶器官的经穴特异性体现。.将120只SD大鼠，随机分为12组，即健康组（健康空白、健康经穴、健康对照、健康百会、健康大椎、健康足三里）和疾病组（疾病空白、疾病经穴、疾病对照、疾病百会、疾病大椎、疾病足三里）每组10只，疾病组大鼠采用癫痫大鼠模型。造模成功后，各组均进行10d的干预，每日1次，每次30min，治疗周期为10d，于第11d取材。取每组大鼠左侧海马组织，用HE染色观察神经元病理形态学改变；取每组大鼠右侧海马组织，用流氏细胞仪和液相芯片技术分别观察海马组织细胞凋亡及细胞因子的表达情况。.本实验中，在大鼠健康状态下，针刺百会、大椎、足三里单穴和组穴可使海马组织早期凋亡升高（P＜0.05），而在癫痫疾病状态下，针刺未对早期凋亡产生影响（P＞0.05）；各针刺组在大鼠不同机能状态下均可良性调控海马组织阳性细胞率、细胞凋亡及细胞因子的表达（P＜0.05），且各单穴组的总体改善程度优于经穴组（P<0.05）。研究结果发现：①单穴和组穴在调控海马组织神经细胞早期凋亡方面具有特异的靶向性，且与大鼠的机体状态相关。②针刺百会、大椎、足三里各单穴及组穴可通过降低健康和癫痫疾病大鼠海马组织阳性细胞率、减少细胞凋亡，调控炎性因子VEGF、RANTES、IL-18的表达，发挥其对脑的保护作用，这种效应以针刺单穴为著。