基于 LncRNA-ANCR 介导MAF/MAFB 信号通路研究清热祛湿方治疗特应性皮炎的分子机制研究

Atopic dermatitis (AD) has a high incidence and is lack of effective treatment. Many studies have shown that AD patients are often accompanied by skin barrier dysfunction, increase of LncRNA-ANCR and decrease of MAF/MAFB downstream transcription factor. Previous studies have found that Qingre-Qushi prescription is effective in treating acute AD skin lesions but mainly focused on regulating immunity. Based on the latest theory of epidermal differentiation mediated by ANCR/MAF/MAFB signaling pathway, this topic intends to explore the mechanism of Qingre-Qushi Recipe in the treatment of AD. Dermatophagoides farinae, a common pathogenic factor of AD, is to be used in AD model and human keratinocytes in vitro is to be used to explore whether Qingre-Qushi Recipe regulates MAF/MAFB signaling pathway mediated by LncRNA-ANCR, so as to provide theoretical basis for clinical treatment of AD with traditional Chinese medicine.

特应性皮炎(AD)发病率高，目前尚缺乏有效治疗手段。诸多研究显示AD患者常伴皮肤屏障功能障碍，LncRNA-ANCR增多且其下游转录因子MAF/MAFB水平降低。本人前期研究发现清热祛湿方治疗AD急性期皮损疗效确切。但以往对清热祛湿方的研究主要集中在调节免疫方面，基于ANCR/MAF/MAFB信号通路介导表皮分化的最新理论，本课题拟从该信号通路探讨清热祛湿方治疗AD的作用机制。研究采用粉尘螨这一AD常见的致病因子，利用小鼠AD模型和体外培养人角质形成细胞，探索清热祛湿方通过调控LncRNA-ANCR介导MAF/MAFB信号通路调节皮肤屏障蛋白以修复皮肤屏障功能从而治疗AD的作用机制，为中医药临床治疗AD提供理论依据。

特应性皮炎(AD)发病率高，目前尚缺乏有效治疗手段。诸多研究显示AD患者常伴皮肤屏障功能障碍，LncRNA-ANCR增多且其下游转录因子MAF/MAFB水平降低，其下游屏障相关蛋白FLG、KRT和LOR等相应降低，最终影响皮肤屏障功能而引起发病。清热祛湿方由蒲公英、苦参、白花蛇舌草和苍耳子组成，具有清热解毒，祛湿止痒的功效，项目组前期研究发现清热祛湿方治疗AD急性期皮损疗效确切，但以往对清热祛湿方的研究主要集中在调节免疫方面，基于LncRNA-ANCR/MAF/MAFB信号通路介导表皮分化的最新理论，本项目从该信号通路探讨清热祛湿方治疗AD的作用及其机制。本项目首先借助UPLC-Q-TOF-MS技术初步鉴定和分析清热祛湿方的有效成分，然后利用小鼠AD模型和体外培养人角质形成细胞（HaCaT），探索清热祛湿方通过调控LncRNA-ANCR介导MAF/MAFB信号通路调节皮肤屏障蛋白以修复皮肤屏障功能从而治疗AD的作用机制，为清热祛湿方临床治疗AD提供理论依据。通过研究：（1）初步鉴定和推测了清热祛湿方提取液中的化合物，为进一步深入研究该方的药效物质基础提供理论依据。（2）发现不同浓度清热祛湿方干预组小鼠皮损严重程度均轻于模型组，皮肤组织中LncRNA-ANCR不同程度的降低，转录因子MAF、MAFB及下游KRT1、LOR及FLG表达均不同程度升高，且清热祛湿方低、中、高剂量组小鼠相关因子表达水平呈现药物浓度梯度依赖性趋势，提示清热祛湿方可有效减轻AD小鼠的皮损严重程度，上调皮肤屏障功能相关蛋白的表达，是一个可用于治疗AD的药物。（3）发现清热祛湿方含药血清可促进HaCaT细胞中MAF与MAFB的表达，增加FLG蛋白的含量，且清热祛湿方含药血清对MAF、MAFB与FLG的调控依赖于LncRNA-ANCR，提示清热祛湿方可能通过调控LncRNA-ANCR介导MAF/MAFB信号通路调节皮肤屏障蛋白以修复皮肤屏障功能从而达到治疗AD的作用。综合上述结果，本研究为揭示清热祛湿方修复皮肤屏障功能阻止AD进一步发生发展的机制奠定了坚实的基础，同时，为进一步深入全方位解读清热祛湿方治疗AD的多靶点和多环节机制提供了重要的提示性线索。