利用蛋白质组技术研究亚洲玉米螟中肠Bt Cry1A毒素结合蛋白及其抗性产生机理

本项目将首次对Bt毒素蛋白对亚洲玉米螟的作用机理及玉米螟对Bt毒素产生抗性突变的机理在蛋白质水平上进行研究。应用蛋白质组技术构建分析亚洲玉米螟中肠刷状膜囊的蛋白质组；结合west and ligand blot等诊断方法研究Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1Ah、Cry1Ie等Bt蛋白与敏感种群、2个抗性种群、敏感与抗性杂交F1及回交后代种群的中场刷状膜囊结合位点特异性蛋白质的检测和分离，分析比较不同种群杂交带的数量、种类、及亮度间的差异；结合抗性生测结果，分析抗性基因的显、隐性以及交互抗性；通过west blotting和质谱连用，分析鉴定特异性的目标蛋白。本项目的研究结果将为从理论上阐明Bt毒素的杀虫作用机理提供科学依据，研究明确不同蛋白结合位点的异同将为合理布局不同转基因作物，以避免抗性和交互抗性的产生以及新基因的开发具有重要的指导意义，因此本项目具有重要的理论和实践意义。