普洱茶发酵过程对新烟碱手性农药降解行为影响研究

Neonicotinoid insecticides bind to the postsynaptic nicotinic acetylcholine receptor of animals, which will be harmful for bee and child's nervous system. As the most used widely pesticide, we maybe underestimate its risk in tea, especially for its fermentation under house with the puer tea. Enantioseletive degradation of nenicotinoid such as dinotefuran, paichongding, epoxy insect pyridine will been investigated to elucidate its behavior and the rule of migration transformation in processing ,storage, brewed puer tea. The metabolite will be confirmed. It will explore the enantioselective mechanism of neonicotinoid in puer tea, and the risk assessment of pollution and control technology and standard revised in old year puer tea.

作为茶叶上用量最大的杀虫剂，新烟碱类农药因其对蜂蜜和儿童的神经系统造成伤害，将评估其安全性，特别是在马背上发酵的普洱茶。本项目拟选择新烟碱类农药呋虫胺、哌虫啶、环氧虫啶为研究对象，通过分离培养优势菌群，手性色谱分离手性残留物，对映体比例和高分辩质谱鉴定代谢产物，农药与代谢产物的构效关系，研究普洱茶熟茶喔堆发酵中酶促反应和普洱生茶自然发酵下多酚类自氧化对手性农药的代谢途径和对映体选择性富集行为的差异，探讨其立体选择性主要机制。本项目的开展将为评价普洱茶质量安全提供科学依据和理论支撑，为普洱茶中手性新烟碱农药标准的制修订提供更真实准确的依据。

食品中农药残留是热点问题，新烟碱类农药呋虫胺、氟啶虫胺肼、环氧虫啶等含有一或二对对映异构体，在代谢或降解会带来手性异构体的富集，由于不同构型的对映体生物活性或者毒性是不同的，非手性浓度监测将会对茶叶质量安全评估带来大的风险和不确定性。.项目首次建立磁性多壁碳纳米管为吸附剂，利用超高效液相色谱-串联质谱-线性离子阱，同时测定手性碳、手性磷、手性硫等25种手性农药残留的高灵敏度分析方法，为监测和评价手性农药富集提供检测手段。以新烟碱类农药氟啶虫胺肼、呋虫胺、环氧虫啶为研究对象，结果表明氟啶虫胺肼、呋虫胺的降解没有立体选择性，环氧虫啶的降解有手性富集，为安全评价普洱茶中手性农药最大残留限量深入到分子空间结构提供科学依据。.从普洱茶中分离经过鉴定5种菌为Aspergillus（曲霉属），Aspergillus niger（黑曲霉）；Aspergillus（曲霉属），Aspergillus fumigatus（烟曲霉）；Cladosporium（枝孢属）； Penicillium（青霉属），皮落青霉；Penicillium（青霉属），Penicillium citrinum（桔青霉）。结果表明烟曲霉和桔青霉对呋虫胺对映体降解的有选择性富集，降解时间长，R-呋虫胺残留多，黑曲霉对呋虫胺的选择性富集与前2种菌结果相反，降解时间长，S-呋虫胺残留多。皮落青霉对呋虫胺的降解没有对映体选择性。.建立高分辨质谱代谢组学，对呋虫胺的主要降解产物为1-甲基-3甲基-5呋喃-盐酸胍和1-甲基-3-（四氢-3-呋喃甲基）脲，探讨其代谢过程为脱硝基和氧化反应；对环氧虫啶代谢产物的分子结构进行解析，主要为C10H11ClN4O3和C14H12N4O，探讨其代谢过程为脱呋喃环和脱氯反应，将用于普洱茶中手性新烟碱农药残留的安全性评价。