抗原特异性CD4+ Treg/Th17细胞漂移在慢乙肝炎症变化过程中的作用与机制研究

Th17细胞是不同于Th1、Th2的新型Th细胞亚群，其在多种自身免疫性疾病及感染性炎症反应中发挥了极为关键的作用，且CD4＋调节性T细胞（Treg）与Th17细胞在分化与功能上密切关联。我们的前期研究表明，慢乙肝患者外周血抗原特异性CD4＋Treg比例明显上调，而外周特异性CD4＋Th17细胞比例与炎症水平正相关。目前抗原特异性CD4＋Treg/Th17细胞的相互分化及其动态平衡在慢乙肝炎症变化过程中的作用与机制尚属空白研究领域。我们拟通过对不同炎症期慢乙肝患者肝穿组织标本的检测，结合HBV转基因小鼠(Tg)胸腺T细胞亚群的体外诱导及过继转移实验，采用分子生物学和免疫学方法探讨抗原特异性CD4＋Treg和Th17细胞在诱导分化、相互调控及炎症损伤中的机制，初步阐明CD4＋Treg/Th17细胞"漂移"在慢乙肝患者肝脏炎症变化过程中的作用，为进一步寻求慢乙肝的免疫治疗新策略提供实验依据。

Th17细胞是不同于Th1、Th2的新型Th细胞亚群，CD4＋调节性T细胞（Treg）与Th17细胞在分化与功能上密切关联。目前抗原特异性CD4＋Treg/Th17细胞的相互分化及其动态平衡在慢乙肝炎症变化过程中的作用与机制尚属不清楚。本项目采用不同炎症期慢乙肝患者的肝穿组织标本，结合HBV转基因小鼠胸腺T细胞亚群的体外诱导及过继转移实验，通过流式细胞术、免疫组化、荧光定量PCR、免疫印迹、细胞培养、ELISA等手段进行检测分析。结果发现（1）Foxp3+Treg细胞和IL-17+ Th17细胞均在慢乙肝（重度）患者的肝组织中浸润增加，且在肝脏炎症因子微环境下Foxp3+ Treg 可能部分向IL-17+ Th17转化（漂移）；（2）抗原特异性CD4+ iTreg和CD4+ Th17细胞可在体外诱导并扩增，TGF-β和MAPK信号通路参与了iTreg向 Th17细胞的诱导转化过程；（3）过继转移抗原特异性Th17细胞并不能打破HBV Tg小鼠的免疫耐受状态。这些结果表明不同炎症因子微环境可诱导CD4＋Treg/Th17细胞“漂移”并参与慢乙肝患者肝脏炎症的变化过程，但体内CD4＋Treg向Th17细胞转化的内环境机制有待进一步研究。