hENT1/TS靶向预测诊断胰腺癌化疗药敏的实验研究

The high chemoresistance of pancreatic cancer is the main cause of poor prognosis.Recent studies reveal that it does not exists cross resistance between the two most effective chemotherapeuticses of pancreatic cancer（Gemcitabine and Fluorouracil）.It prompts the research of diagnosis technology which can forecast chemotherapy sensibility could conduct effectively the establishment of individualized chemotherapy for pancreatic cancer.There are experiments demonstrating the expression of hENT1 and TS is high close related to chemoresistance of the two chemotherapeuticses above,which have potential to be the marker of chemotherapy sensibility forecasting for pancreatic cancer.This result was also confirmed by our experimental and pre-clinical researches.On the basis of important development of 863 project which is undertaken by our research team,we propose that the correlation between expression of hENT1、TS and chemotherapy resistance would be elucidated further by way of pancreatic cancer primary cell, and in diverse chemoresistant pancreatic cancer orthotopic animal model,through first-synthetic hENT1-SPIO、TS-SPIO nanoprobe,the establishment and application of molecular imaging diagnosis technology for chemotherapy sensibility forecasting and curative effect monitoring of pancreatic cancer is studied to discriminate the primary and acquired chemoresistance,finally to make progression of the researches of reversing multi-chemoresistance of pancreatic cancer.

胰腺癌高度化疗耐药特性是导致其预后极差的主要原因。近年的实验结果发现针对胰腺癌最有效的两种化疗药物（吉西他滨及氟尿嘧啶）间并不存在交叉耐药，这提示研发针对性的化疗敏感性预测诊断技术将有效指导胰腺癌个体化疗方案制定。而研究表明hENT1及T S表达谱分别与这两种药物的耐药性密切高度相关，并具有成为胰腺癌药敏预测诊断标记物的潜力，这一结果也在我们前期临床及实验室研究中得到了证实。在本学科承担863项目并取得重要进展的基础上，我们计划在本项目中利用胰腺癌肿瘤原代细胞进一步明确hENT1及TS与化疗耐药间的关系，并首次合成hENT1-SPIO及TS-SPIO纳米探针，在具有不同耐药性的胰腺癌原位动物模型上研究并验证胰腺癌药敏预测及疗效监测分子影像学诊断技术的建立与应用价值探讨，以指导胰腺癌原发性及获得性耐药个体的鉴别，最终促进胰腺癌多药化疗耐药的相关研究进展。

胰腺癌高度化疗耐药特性是导致其预后极差的主要原因，而研发针对性的化疗敏感性预测诊断技术将有效指导胰腺癌个体化疗方案的制定。本课题组前期的研究发现hENT1（人平衡型核苷转运蛋白1）及T S（胸苷酸合成酶）与胰腺癌单药化疗最有效的两种药物（吉西他滨、5-FU）的耐药性高度相关，具有成为胰腺癌药敏预测诊断标记物的潜力。我们计划在本项目中进一步明确hENT1及TS对胰腺癌化疗耐药等恶性生物学行为的影响及潜在机制，并在此基础上合成hENT1-SPIO及TS-SPIO纳米探针，为进一步在临床建立胰腺癌化疗药敏筛查监测技术提供有效的实验室依据。在本项目中，我们构建了多株胰腺癌hENT1及TS的稳定转染细胞株，实验室研究证实hENT1及TS分别与吉西他滨、5-FU等化疗药物敏感性密切相关；同时，我们首次发现TS这一广泛应用于临床多种肿瘤预后分析的分子靶点可以显著影响胰腺癌转移能力，而其通过下游产物dTMP调节EMT水平则可能是主要的潜在机制。同时，我们在分别合成靶向抗体及SPIO的基础上，初步通过共价结合的方法构建了hENT1-SPIO及TS-SPIO靶向示踪剂，体内外实验均显示这些分子造影剂具有良好的磁共振成像能力及靶向结合能力。同时，在项目资助下我们将本项目中有关胰腺癌化疗耐药标志物筛查的工作进一步与临床结合，通过高通量筛查找到了一组可以高效鉴别化疗耐药胰腺癌患者的分子靶点。这些实验结果为明确hENT1及TS与胰腺癌多种恶性生物行为间的关系、进一步建立以hENT1及TS为核心的胰腺癌化疗筛选、监测技术提供了坚实的实验室依据，并为进一步探寻高效的胰腺癌化疗耐药诊断及治疗生物靶点提供了实验基础。