表皮干细胞肌成纤维母细胞化的进一步确证及其在瘢痕形成中的作用研究

瘢痕形成是皮肤创伤修复的主要形式。目前认为，肌成纤维母细胞是皮肤瘢痕化修复的主导因素，但该细胞的来源尚不完全清楚。近期，我们研究初步显示，体外表皮干细胞易于转分化为肌成纤维母细胞样细胞，体内表皮干细胞在创口处发生间质迁移。基于上述研究发现，我们推测表皮干细胞可能是皮肤创伤修复过程中肌成纤维母细胞的主要细胞源。我们拟开展以下研究：1.通过体外诱导及表皮干细胞创口移植，从体内外两方面进一步确证表皮干一肌成纤维母细胞化；2.寻找表皮干一肌成纤维母细胞化关键性表观遗传分子机制；3.深入探究表皮干一肌成纤维母细胞化对瘢痕形成的影响；4. 阐明表皮干一肌成纤维母细胞化在不同发育阶段胚鼠创伤修复中的作用。本研究将首次阐明表皮干细胞在瘢痕化修复中关键性作用，为建立完美修复体系与抗瘢痕化修复药物的开发奠定基础。

创伤修复是多种细胞参与的复杂过程，其中角质细胞、肌成纤维母细胞在该过程中扮演十分重要的角色，我们发现创伤修复的过程中存在角质细胞-间质化的现象，未分化角质细胞移植到皮肤肉芽组织后，在肉芽组织微环境的作用下，可发生SMA阳性肌成纤维母细胞样转变，从而提高创口愈合能力；留取不同愈合天数的创口组织检测与修复相关的基因水平的转变，发现移植组创口修复基因SMA、COLLAGENIII、MMP9、MMP13的表达水平显著高于未移植组，证实移植角质细胞能够通过间接的方式促进创口的愈合；同时，在血清诱导的条件下，包皮全层皮片诱导后，出现角质细胞-间质化；表皮片后基底层及邻近基底层的角质细胞出现SMA阳性肌成纤维母细胞样转变，进一步评定角质细胞-肌成纤维母细胞转变相关基因表达，发现上皮性标记E-Cadherin、K14的表达水平降低，间质化相关的转录分子N-Cadherin、Twist、Slug、vimentin、SMA，间质化后功能性指示性标记MMP9, CollagenI表达的增强。本项目在首次发现表皮干-肌成纤维母细胞化的基础上，进一步阐明了表皮干细胞在瘢痕化修复过程中关键性作用及分子机制，为建立完美修复体系与抗瘢痕化修复药物的开发奠定基础。