microRNAs对PS1/PS2双基因敲除致小鼠神经退行性病变调控机制的研究

近期发现microRNAs(miRNAs)在神经退行性病变过程中有重要作用，但参与调控的特异性miRNA及其调控机制均有待进一步阐明。通过microRNA芯片实验，我们获得了在PS1/PS2双基因敲除小鼠(dKO)中差异表达的miRNAs，并利用生物信息学方法初步分析了这些miRNAs调控的靶基因。本项目拟选择其中的miR-671-5P、miR-709为主要研究对象（目标miRNAs），采用Luciferase assay、RNA干扰等技术，确认其作用靶标并探讨在转录后调控中的分子机制；利用病毒载体介导的RNA干扰等方法，在体干预dKO小鼠特异脑区的目标miRNAs，并从分子、细胞、组织以及行为等不同层次研究目标miRNAs的生理功能，为探讨miRNAs对神经退行性病变调控的机制以及作为可能的治疗靶点提供实验依据。

近期发现microRNAs(miRNAs)在神经退行性病变过程中有重要作用，但参与调控的特异性miRNA 及其调控机制均有待进一步阐明。通过microRNA 芯片实验，我们获得了在PS1/PS2 双基因敲除小鼠(DKO)中差异表达的miRNAs，并利用生物信息学方法初步分析了这些miRNAs 调控的靶基因。本项目选择其中的miR-146a, miR-92a, miR-125b，miR-29a等microRNA作为研究对象，采用Luciferase assay技术，在体外实验中确认了miR-146a对Syt1、GDNF以及Npas4等基因具有抑制作用；miR-92a可以抑制SYN IIb的表达；而miR-125b则可抑制VEGFA及NCAM的表达水平。进一步的蛋白水平研究发现：miR-125b可能通过抑制VEGFA的表达影响DKO小鼠大脑皮层中的神经-血管单元，从而加剧AD的症状；同时miR-125b可能抑制神经粘附分子NCAM的表达，从而影响DKO小鼠的神经可塑性，进而影响该小鼠的认知功能。本研究为探讨miRNAs 对神经退行性病变调控的机制以及作为可能的治疗靶点提供了实验依据。通过本项目的资助，已正式发表SCI论文8篇（全部标有本项目的课题号），另有部分论文正在撰写中。