维、汉两族急性冠脉综合征患者外周血微粒的细胞来源和致血栓活性的关联研究

急性冠脉综合征（ACS）是以冠状动脉粥样硬化斑块不稳定为基本病理生理特点，以急性心肌缺血为共同特征的一组临床综合征。但是粥样硬化斑块基础上形成血栓的分子生物学机制仍不清楚。微粒（MPs）在正常人体血液循环中即可测到，在许多疾病状态下，特别是在高度血栓形成危险的疾病中其浓度明显升高。我们在前期研究中从健康志愿者血浆中分离MPs并在体外诱导发现红细胞源MPs在体外有致血栓活性，并把分离的红细胞源MPs经尾静脉注入到IgM-/-小鼠体内或注入到分离的小鼠血浆中，动物体内外再次证实了红细胞源MPs与血栓形成相关。我们提出假说：ACS患者血浆中可能有不同细胞来源的MPs，这些MPs可能与血栓形成有关。本研究旨在分析维、汉两族ACS患者外周血微粒的细胞来源同时，检测这些微粒的致血栓活性并分析其启动和传播血栓形成的可能机制，对阐明维、汉两民族ACS患者冠状动脉内血栓形成的分子生物学机制提供理论基础。

背景：本研究观察ACS患者检测和监测血浆中红细胞源性和血小板源性MPs含量及致血栓形成的高峰时间前移有助于揭示ACS发病机制和了解病情发展，同时观察维吾尔族、汉族ACS患者血液中内皮细胞MPs水平及其与血脂的关系。方法：1）受试者来自2011.1~2014.12年本院心内科门诊诊断ACS的患者和非冠心病人群。研究对象分为ACS组（n=200）及非冠心病组（n=100），收集ACS患者及非冠心病患者外周血，通过离心用钙离子载体A23187分离红细胞MPs。用抗体-糖蛋白A（glycophorine A）标记红细胞微粒，抗AnnexinV-CD41-FITC和抗CD41-PE标记血小板源性MPs，在流式细胞仪上检测患者外周血红细胞和血小板源性MPs的水平。将ACS患者红细胞源或血小板源性MPs注入到非冠心病患者去除MPs的血浆中，用荧光凝血酶底物启动血栓形成，检测红细胞源或血小板源性MPs的致血栓活性。2）选取2012年1月-2013年8月在本院的ACS患者100例作为病例组，选取健康体检者100例作为对照组，用流式细胞仪检测内皮细胞微粒（EMPs）的含量，检测血浆中血脂相关指标的含量。结果：1）与ACS组红细胞源性微粒比较，ACS组的AMI亚组和UAP亚组红细胞源性MPs均增高，差异有统计学意义（P<0.05）。与ACS组血小板源性MPs比较，ACS组的AMI亚组和UAP亚组血小板源性MPs均增高，差异有统计学意义（P<0.05）。每个时间点的ACS患者relative fluorescence unit均显著高于非冠心病患者relative fluorescence unit，差异有统计学意义（P< 0.05）。2）维、汉族病例组血液中内皮细胞MPs水平高于对照组 （P<0.05）；多重线性回归显示内皮细胞MPs的水平与血脂相关指标存在明显相关 （P<0.05），路径分析显示，内皮细胞MPs主要受高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的影响 （P<0.05）。结论：1）ACS患者的外周血红细胞源性MPs含量显著升高及致血栓形成的高峰时间前移，可诱导凝血酶生成。血小板处于激活状态，血小板源性MPs大量释放并参与促凝作用。2）ACS血液中EMPs水平明显增高，而且HDL-C含量与EMPs水平之间呈负相关，ACS发病过程可能与血液中内皮细胞MPs水平增高相关.