书虱AChE的毒理学及基因克隆表达和分子诊断技术研究

在本课题组前两个与书虱抗性生化机理有关的基金项目研究的基础上，瞄准国际上昆虫AChE分子毒理学这一研究热点，以目前粮仓中严重危害的书虱类害虫嗜卷书虱和嗜虫书虱为主攻对象，综合运用昆虫生理毒理学和分子科学等学科知识，比较研究书虱不同品系或种群对有机磷和氨基甲酸酯类常用杀虫剂的敏感性差异；通过亲合层析法分离纯化AChE并研究纯化产物的动力学和毒理学特性；应用RT-PCR及RACE技术克隆书虱AChE基因的全长序列，进而找出抗性的突变位点及可能引起的蛋白质结构的改变；通过表达载体的构建对书虱AChE进行体外表达并分析表达产物（酶）的动力学和毒理学特性；最后应用PCR-RFLP技术建立自然种群抗性的分子诊断技术。研究结果不仅在理论上能够深化对昆虫AChE分子毒理学特性的认识，充实生物进化及遗传变异的研究内容，在实践上将有可能为针对变化了的分子结构设计特定的靶标杀虫剂提供基础资料。