PDGF介导PDGFR过表达内皮祖细胞靶向归巢及局部调控损伤动脉不良重构

动脉内膜损伤后血管不良重构是PCI术后常见并发症。单纯内皮祖细胞（EPC）移植防治损伤动脉不良重构效果不佳，原因是EPC归巢数量少，缺乏局部促增殖等机制及不能干预其他促不良重构因素。PDGF在损伤动脉局部迅速、持续大量产生，通过作用于PDGFR促进vSMC等迁移、增殖，是促进不良重构的主要因素。本课题采用PDGFR基因转染EPC，观察PDGF对转染后EPC部分生物学功能的改善作用；并观察转染后EPC对PDGF促进vSMC迁移、增殖及抗凋亡的抑制作用。动物实验采用转染PDGFR的自体脾源性EPC移植给颈动脉损伤小鼠，观察损伤动脉产生的PDGF介导PDGFR过表达EPC靶向归巢，促进其局部增殖及抑制其局部凋亡的作用；并观察归巢的EPC过表达PDGFR竞争性抑制局部PDGF促vSMC增殖的作用，以期获得从多个靶点阻抑损伤动脉不良重构的方法。本课题为防治PCI术后靶血管不良重构提供新的治疗思路。

该项目已根据研究计划顺利完成各项研究指标。.主要完成的研究内容如下：1、内皮祖细胞的培养、鉴定；2、平滑肌细胞的培养及鉴定；3、PDGFRβ质粒构建；4、小鼠颈动脉损伤模型模型的建立；5、PDGFRβ在EPCs里的亚细胞定位检测；6、PDGF/PDGFR 在调控EPCs 增殖、迁移及管型形成中的作用及机理的研究；7、PDGF/PDGFR 在调控EPCs 迁移及归巢中的作用的研究；8、损伤血管局部PDGF/PDGFR通过自分泌/旁分泌介导抑制平滑肌增殖、促进其凋亡的研究。9、PDGFR过表达EPC移植在促进损伤血管修复中的作用及机制。.取得的主要成果如下：1、脾源性EPC极低表达PDGFR，PDGFR基因转染可获得PDGFR稳定高表达EPC，外源性PDGF 可诱导PDGFR过表达EPC的趋化迁移，可促进PDGFR过表达EPC增殖，可抑制PDGFR过表达EPC抗凋亡，可促进PDGFR过表达EPC在Matrigel胶中生成血管样结构；PDGFR过表达EPC可抑制PDGF介导的vSMC迁移、增殖及抗凋亡。2、脾切除小鼠颈动脉损伤后在动脉内膜损伤局部迅速、持续大量产生PDGF，其通过与移植的自体脾源性EPC过表达的PDGFR相互作用，增加EPC在损伤动脉壁的归巢数量；损伤动脉局部产生的PDGF旁分泌作用于归巢的自体脾源性EPC的PDGFR，促进归巢的EPC增殖及抑制其凋亡；归巢的EPC表达PDGFR，竞争性抑制PDGF自分泌、旁分泌介导的vSMC增殖及抗凋亡，PDGFR过表达EPC移植较单纯EPC移植或单纯阻断PDGF更为有效地加速损伤动脉再内皮化，抑制新生内膜增生，阻抑损伤动脉不良重构，恢复损伤动脉生物学功能。3、该项目研究已发表SCI论著3篇，1篇SCI论著还在撰写阶段。4、该项目研究培养博士研究生1名。