desmuslin基因在慢性静脉功能不全发病中的作用及其转录调控机制研究

我们前期的研究发现在慢性功能不全静脉管壁的血管平滑肌细胞中，desmuslin基因在转录水平上呈现明显的低表达。本研究拟采用RNA干扰技术封闭desmuslin基因在正常静脉血管平滑肌细胞中的表达，观察细胞形态和超微结构的改变，初步了解desmuslin基因的表达缺失对血管平滑肌细胞的影响。并对desmuslin基因5′端上游序列的不同长度片段进行亚克隆,构建系列重组pGL2荧光素酶报告基因载体,转染体外培养的血管平滑肌细胞并检测luc基因的一过性表达活性。然后应用电泳迁移率变动分析技术,鉴定活性片段与血管平滑肌细胞核蛋白质提取物的结合能力，确定对desmuslin基因转录起调节作用的上游区域。本课题为前期研究成果的继续深入研究，可发现与慢性静脉功能不全发病相关的新的分子生物学事件，对阐明该病的发生机理和发展以及进行分子水平上的治疗具有重要的意义。