葡萄膜黑色素瘤非编码小RNA的系统鉴定与功能研究

Uveal melanoma, arising from uveal melanocytes, is the most common malignant intraocular tumor in human adults, and its molecular mechanism remains unclear. Small non-coding RNAs, as an important group of epigenetic regulators, play key roles in the development of uveal melanoma. The project aims to systematically identify small non-coding RNAs in uveal melanoma, study their function and mechanism. First, We will apply the technology of small non-coding RNA library construction, as well as microarray analysis to identify and validate small non-coding RNAs in uveal melanoma. Then further investigations will be conducted into the effects of small non-coding RNAs on uveal melanoma cell proliferation, apoptosis and migration. On this basis, the molecular mechanism of specific small non-coding RNAs will be explored, including target genes, interacting proteins and regulated signaling pathways. Also, in vivo animal model of uveal melanoma will be performed to investigate the role of specific small non-coding RNAs in tumor development. Finally, we will not only elucidate the function and molecular mechanism of small non-coding RNAs in the development of uveal melanoma, but also provide novel strategies for its diagnosis and therapy.

葡萄膜黑色素瘤起源于葡萄膜黑色素细胞，是成人眼中发病率最高的恶性肿瘤，其分子机制尚不清楚。非编码小RNA 是一类非常重要的表观遗传调控因子，通过对基因表达的调控而在肿瘤发生过程中发挥重要作用。本课题旨在系统鉴定葡萄膜黑色素瘤中的非编码小RNA并研究其功能与机制，首先通过非编码小RNA文库构建技术及小RNA 芯片技术系统发现葡萄膜黑色素瘤中差异表达的非编码小RNA并验证，进而深入研究特定非编码小RNA对葡萄膜黑色素瘤细胞增殖、凋亡与迁移的影响。在此基础上，研究特定非编码小RNA作用的靶基因、相互作用的蛋白质与调控的细胞内信号通路，通过黑色素瘤动物模型在体内研究特定小RNA的功能。从而阐明非编码小RNA在葡萄膜黑色素瘤发生过程中的功能与分子机制，为其诊断和治疗提供新的方法。

葡萄膜黑色素瘤起源于葡萄膜黑色素细胞，是成人眼中发病率最高的恶性肿瘤，其分子机制尚不清楚。非编码小RNA 是一类非常重要的表观遗传调控因子，通过对基因表达的调控而在肿瘤发生过程中发挥重要作用。本项目首先通过NanoStringnCounter技术系统分析了葡萄膜黑色素瘤中的非编码小RNA表达谱，共鉴定出40个显著下调的非编码小RNA，以及15个显著上调的非编码小RNA。进一步通过Targetscan预测了这些非编码小RNA的靶基因并构建了小RNA-靶基因网络，通过GO分析等生物信息学方法分析了特异性靶基因的生物学功能以及介导的重要信号通路。进一步的研究揭示：miR-96通过调控靶基因c-Met和MITF而抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭；miR-124a在葡萄膜黑色素瘤中因DNA甲基化和组蛋白去乙酰化导致基因沉默，可调控靶基因CDK4、CDK6、EZH2以及cyclin D2而抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖，迁移与侵袭；miR-135通过下调SIRT1与GNAQ的表达而抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移与侵袭。miR-142-3p通过下调CDC25C、TGFβR1、GNAQ、WASL和RAC1的表达而抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖、迁移与侵袭。miR-199a-3p通过下调c-Met与mTOR的表达而起到肿瘤抑制因子的作用。总之，本项目阐明了非编码小RNA在葡萄膜黑色素瘤中的特征表达谱、功能与分子调控机制，为其临床诊断和治疗提供了新的靶点。