肝细胞核因子4（HNF4）在重症乙型肝炎发病中的作用及机理研究

重症乙型肝炎的发病涉及宿主和病毒两方面因素的影响。我们的研究显示：慢性乙肝患者体内肝细胞核因子4（HNF4）表达增高且与HBV复制呈正相关；抑制重症肝炎小鼠模型中HNF4表达能减少肝组织的坏死并降低死亡率。. 本项目拟通过建立化学性、免疫性和病毒性三种不同类型的重症肝炎小鼠模型并结合HBV复制小鼠模型，利用RNA干扰技术，观察抑制肝内HNF4a表达对有或无HBV复制的重症肝炎小鼠的死亡率及肝组织病理改变的影响，以阐明HNF4a在重症乙型肝炎中的可能作用。并进一步通过检测肝组织中Bcl-XL、c-Jun、JNK、NF-kB等细胞因子的表达，利用JNK和NF-kB化学抑制剂特异阻断信号传导通路，了解HNF4a在重症乙型肝炎发生中的作用是否与JNK和（或）NF-kB凋亡信号传导通路有关。. 本研究将有助于阐明重症乙型肝炎的发病机制，并为寻找重症肝炎治疗的新手段提供可能的作用靶点。

重症乙型肝炎的发病涉及宿主和病毒两方面因素的影响。我们既往的研究显示：慢性乙肝患者体内肝细胞核因子4（HNF4）表达增高且与HBV复制呈正相关；抑制重症肝炎小鼠模型中HNF4表达能减少肝组织的坏死并降低死亡率。本项目通过建立重症肝炎小鼠模型并结合HBV复制小鼠模型，对HNF4a在重症肝炎发生中的作用和可能机制进行了深入研究。主要学术成绩有：(1)建立了无HBV复制和有HBV复制的重症肝炎小鼠模型，发现HNF4表达水平在重症肝炎发生的早期是增高的，提示HNF4表达增加可能与重症肝炎的发生有关；(2)构建了针对HNF4a的肝特异性RNA干扰质粒，通过抑制HNF4a在肝脏内的表达，发现预先抑制HNF4a表达可显著改善有HBV复制的重症肝炎小鼠的肝组织损伤并降低死亡率，提示抑制HNF4水平可阻止重症肝炎的发生；(3)对重症肝炎小鼠肝脏全基因表达谱进行分析发现，细凋亡信号传导通路在重症肝炎小鼠肝组织内存在明显改变，其中以NF-kB细胞凋亡信号通路变化最为显著；通过利用化学抑制剂特异性阻断NF-kB表达后，发现NF-kB细胞凋亡信号通路的关键炎性分子水平未出现明显异常，且重症肝炎小鼠肝功能改善明显、组织病理损伤明显减轻和小鼠死亡率显著下降，提示HNF4a在重症乙型肝炎发生中的作用机制与NF-kB凋亡信号传导通路可能有关。该研究结果不仅从理论上丰富了重症乙型肝炎的发病机制，而且为重症肝炎治疗提供了新的可能作用靶点。