血清淀粉样蛋白P物质对高密度脂蛋白功能及巨噬细胞活化的影响及其在AS发生中的机制研究

Our initial work discovered that the components of HDL include serum amyloid P-component (SAP) and the concentration of SAP increased in the patients with acute coronary syndrome(ACS) compared with the control group. After stimulated by SAP, the HDL-mediated cholesterol efflux capacity improved significantly.Recently foreign studies and the research of our group have shown that there is a close relationship between SAP and the function of HDL and macrophage activation, and SAP may inhibit the development of AS through improving HDL function and reducing macrophage inflammatory response.But the mechanism of SAP on the function of HDL and macrophage activation is not completely clear.In Addition,the influence of SAP on AS and the specific mechanism is still unknow.Therefore, project of the research is that we incubated J774 cells with SAP to elucidate the effects of SAP on HDL functions and macrophage activation, while using gene chip and RNA interference technology to explore the role of SAP on downstream genes and their function expression. Then we establish a atherosclerosis model in APOE-/- mouse fed a high-cholesterol diet. After intravenously injecting SAP in AS model mouse, we explore the effects and mechanism of SAP on the progression of AS, providing new monitoring indicators and intervention manner for AS.

我们前期工作中发现HDL亚组分中存在血清淀粉样蛋白P物质（SAP），且其浓度在急性冠脉综合征（ACS）患者中显著高于正常对照人群，SAP刺激巨噬细胞后，其HDL介导的胆固醇转出率明显比对照组升高。近来国外研究及本课题组的研究都显示SAP与HDL功能、巨噬细胞活化及功能存在密切关系，SAP可能通过改善HDL功能及减轻巨噬细胞炎症反应而抑制AS的发展。但SAP对HDL功能和巨噬细胞活化的作用机制并不明确，SAP对AS的影响及具体作用机制亦未完全清楚。因此，本研究拟：①在细胞水平评估SAP对HDL功能及巨噬细胞活化的影响，同时运用基因芯片、RNA干扰等技术探索SAP作用的下游基因及其功能表达，明确SAP的作用机制；②构建APOE-/-鼠AS模型，静脉注射SAP进行干预，从在体小鼠水平阐明SAP在AS发生中的作用及可能的作用机制，从而为AS的防治提供新的监测指标和干预手段。

近来国外研究及本课题组的研究都显示SAP与HDL功能、巨噬细胞活化及功能存在密切关系，SAP可能通过改善HDL功能及减轻巨噬细胞炎症反应而抑制AS的发展。但 SAP 对 HDL 功能和巨噬细胞活化的作用机制并不明确，SAP对AS的影响及具体作用机制亦未完全清楚。为了阐明以上问题，本课题自2014年1月1日开始，至2017年12月31日结束，我们课题组按照国家自然科学基金合同书研究计划，紧紧围绕既定的研究目标和方向，顺利完成计划内所有的细胞水平及动物水平预实验及正式实验，发现SAP可以通过上调巨噬细胞胆固醇转出调节蛋白的表达，从而增加细胞胆固醇转出率，减少细胞内胆固醇的含量，抑制巨噬细胞泡沫化和炎症因子的释放。与体外实验结果一致，通过腹腔注射SAP使apoE-/-高脂小鼠血清SAP含量升高后，其HDL功能改善，AS程度减轻。.另外在此基础上，对本课题做更进一步探索和延伸，在此基础上我们筛选出SAP作用的下游基因PSRC1，对PSCR1展开深入研究并取得了一定成果。发现沉默巨噬细胞PSRC1基因后，可使SAP抗AS的作用减弱。并且通过过表达巨噬细胞PSRC1也可以调节细胞胆固醇转运蛋白的表达，升高细胞胆固醇转出率，减少细胞内胆固醇的含量，抑制巨噬细胞泡沫化和促炎因子的释放。进一步通过尾静脉注射腺病毒干预，使apoE-/-高脂小鼠的PSRC1基因过表达后，其AS程度明显减轻，斑块稳定性增加。.通过本研究我们已经证实SAP调节HDL功能和巨噬细胞活化的效应和作用机制，并且进一步发现PSRC1与巨噬细胞泡沫化以及AS的发生发展有关。课题计划的所有实验已全部完成，并在原计划研究内容基础上有所增加。本课题具有明显的先进性和创新性，我们在国内外首先报道了SAP对HDL功能以及AS形成的影响，同时也率先发现了PSRC1与AS的形成发展的关系以及作用机制。我们课题组整理实验结果后，公开发表论文共23篇，其中SCI论文8篇，另有2篇IF＞5分的SCI文章处于修稿阶段。因此。本项目的研究结果对于阐明AS的发生机制，寻找新的防治AS的靶点，具有重要意义。