IL-2/CD25单克隆抗体复合物促进移植后CMV特异性T细胞体内重建及机制研究

Hematologic stem cell transplantation（HSCT）remains one of the curative therapies for hematologic malignancies currently available. Posttransplant cytomegalovirus (CMV) infection is one of the major causes of HSCT failure. .Poor CMV-specific T cells reconstruction post-transplant was found to be the key to CMV infection. IL-2 /CD25 monoclonal antibody complex (IL-2 /CD25 mAb) can enhance the survival and proliferation of CMV-CTL in vitro, but the mechanism is unknow. This study intends to：（1）improve the survival, proliferation and killing functions of CMV-CTL post HSCT in vivo by IL-2 /CD25 mAb injection in a humanized stem cell transplantation mouse model;(2) investigate the mechanism of IL-2 /CD25 mAb promoting CMV-CTL phenotypic transformation by inhibiting Akt signaling in vivo; （3）validate the improved CMV-CTL reconstruction post HSCT by IL-2 /CD25 mAb in clinical cohorts. The study would provide new ideas and new targets for the prevention and treatment of CMV infection after transplantation.

造血干细胞移植术(HSCT)是恶性血液病有效乃至唯一的治愈手段。移植后巨细胞病毒（CMV）感染是导致HSCT失败的重要原因之一。研究发现移植后CMV特异性细胞毒T淋巴细胞（CMV-CTL）重建差是导致CMV感染的关键。体外研究示IL-2/CD25单克隆抗体复合物（IL-2/CD25单抗）可提高CMV-CTL存活和增殖能力，其机制不明。本研究拟：（1）在人源化HSCT小鼠CMV感染模型研究IL-2/CD25单抗促进移植后CMV-CTL向记忆表型转化，提高其体内存活、增殖和杀伤功能，增强其抗CMV感染能力；（2）研究IL-2/CD25 mAb通过抑制体内Akt活化促CMV-CTL向记忆表型转化的机制；（3）构建临床队列，验证IL-2/CD25 单抗复合物能促进移植后CMV-CTL重建和降低CMV感染。以期为移植后CMV感染防治提供新思路和新靶点。

造血干细胞移植术(HSCT)是恶性血液病有效乃至唯一的治愈手段。移植后巨细胞病毒（CMV）感染是导致HSCT失败的重要原因之一。移植后CMV特异性细胞毒T淋巴细胞（CMV-CTL）重建差是导致CMV感染的关键。IL-2/CD25轴在T细胞增殖分化中起重要作用，CD25单克隆抗体是HSCT后常用的免疫调节药物，其对HSCT术后免疫细胞重建和CMV-CTL表型及功能的影响尚不清楚。研究内容与结果：（1）纳入2020年8月1日至2021年12月31日在北京大学血液病研究所行单倍体HSCT的397例患者，在HSCT术后+1、+2、+3、+4、+6、+9和+12月采外周血，建立单倍体HSCT患者免疫重建标本库；（2）流式细胞术检测并比较应用CD25单抗（实验组，n=179）和未用CD25单抗患者（对照组，n=89）在HSCT术后+1、+2、+3、+6和+12月外周血免疫细胞数量，CMV-CTL和TEMRA亚群，TN亚群，TCM亚群，TEM亚群的数量。结果显示实验组CD4+CD25+调节性T细胞的数量显著低于对照组，CD4+CD28+效应性T细胞数量显著高于对照组。移植后+2和+3月，实验组CMV-CTL中CD45RA-CCR7+TCM亚群数量高于对照组。（2）检测应用CD25单抗前后CMV-CTL分泌、杀伤功能变化（实验组，n=20），并与对照组（n=10）和健康供者（n=8）比较。检测CD25单抗对CMV-CTL增殖能力的影响。结果显示应用CD25单抗后，CMV-CTL分泌IL-2和TNF-α较前提高，颗粒酶和穿孔素无明显下降，CD107a（脱颗粒酶）表达无显著变化，加入IL-2/CD25单抗后，CMV-CTL增殖能力较单用IL-2和CD25单抗增高。（3）检测CD25单抗对CMV-CTL细胞Akt、mTOR和FOX01/03活化水平的影响，及对记忆型和总CMV-CTL数量的影响。结果显示应用CD25单抗后，CMV-CTL细胞p-Akt水平下降，p-mTOR和p-FOX01/03减低。应用CD25单抗后35d，患者体内CMV-CTL的数量明显增加，且记忆型CMV-CTL的数量包括TCM和TEM均显著增加。本研究阐明了CD25单抗对HSCT后免疫细胞和CMV-CTL细胞重建的影响，并探索了可能的机制。可为移植后CMV感染防治提供新思路和新靶点。