EPCs促进血管新生对脑创伤组织再生修复的作用和机制研究

我们前期研究发现循环血内皮祖细胞（EPCs）与创伤区血管新生密切相关。促进损伤区血管新生，恢复损伤区微循环，达到血管新生和神经新生修复的统一，可能成为一种极具吸引力的全新治疗模式:血管-神经新生。但目前脑创伤后血管新生的机制尚不明确，EPCs参与脑创伤再生修复的作用也不清楚。本课题立项研究EPCs促进血管新生对脑创伤后组织再生修复的作用及机制，探索EPCs与NSCs体内外的相互作用，建立颅内血管新生研究平台，通过血管新生研究平台模拟EPCs参与颅内血管新生的过程并探索脑创伤后颅内血管新生的规律， 进一步研究EPCs促进血管新生在脑创伤后组织再生修复中的作用以及神经新生和血管新生的相互作用，为临床上开展颅脑创伤后促进血管新生的治疗提供理论依据，以期为脑创伤探索一条全新的治疗模式（血管-神经新生, vasculo-neurogenesis）。

本次研究主要集中于EPCs联合NSCs移植对于脑损伤区域修复情况，取得了一下结果：.1.NSCs和EPCs培养：NSCs培养nestin免疫组化染色后，培养所的细胞球绝大多数染色呈强阳性反应，可稳定传代。EPCs进行CD34、CD133免疫组化染色强阳性。.2.VEGF-165诱导分化： VEGF-165在NSCs的增殖与分化中可起调控作用，能促进NSCs的增殖与分化，并可能存在诱导NSCs向神经元方向分化作用。.3. Matrigel基底膜基质与VEGF-165联合作用：Matrigel 基底膜基质可以为NSCs增殖与分化提供理想的三维立体培养环境，并能促进NSCs的分化，与VEGF-165联合应用可以提高神经元的分化比例，且使细胞间形成更近似于在体组织的结构。.4.在大鼠脑损伤区联合移植EPCs和NSCs后，免疫组化染色显示，移植后损伤区CD34阳性细胞和Brdu标记细胞阳性率显著增加，表明两种细胞移植后在损伤区存活并参与其组织修复，移植大鼠神经系统评分水平较对照大鼠明显改善，表明两种细胞的移植可以显著促进神经功能的恢复。.结论：.通过Matrigel和VEGF-165联合模拟血管新生内环境，可以有道神经干细胞的增值与分化，且存在诱导NSCs向神经元分化的可能。同时，EPCs联合NSCs在大鼠脑损伤区移植，可以增加损伤区NSCs和EPCs数量，促进局部新生血管形成和神经组织再生，提高大鼠脑功能恢复水平，具有一定的临床意义。