FISH技术对东南亚缺失型α-地中海贫血植入前遗传学诊断的方法学研究

Hb Bart's胎儿水肿综合征在我国出生婴儿中，占出生畸形的第一位，我国Hb Bart's水肿胎儿都是由- - SEA纯合引起，所以开展- - SEA缺失型α-地中海贫血胚胎植入前遗传学诊断，防止受累患儿的出生，具有优生学意义。本课题拟建立一套适应于东南亚缺失型α-地中海贫血单细胞间期核的荧光原位杂交诊断体系。设计和制备两个荧光DNA单一序列探针，用不同的荧光标记，一个探针位于α-珠蛋白基因的缺失片段内，一个探针位于缺失片段的一侧，进行双色荧光原位杂交检测。在单细胞间期核中应用此种方法可以克服应用广泛的单细胞PCR方法繁琐、复杂、时间长等缺陷，也可以防止单细胞PCR中等位基因脱漏、技术污染等问题所带来的误诊。SEA缺失型α-地中海贫血的荧光原位杂交体系建立和杂交条件完善后，可以将此技术，结合胚胎显微操作技术、单细胞固定技术和辅助生殖技术等，应用于缺失型α-地中海贫血的胚胎植入前遗传学诊断。