活血通降法治疗反流性食管炎黏膜修复机制的相关研究

Reflux esophagitis (RE) is a common disease of Digestive system，the pathogenesis of it is complex，the effect of Western medicine about it is limited and symptoms of patients are easily reiterative，so it is an intractable disease. The methods of treating RE of Traditional Chinese medicine such as alleviating the symptoms, decreasing the recurrence rate and reducing the side effects all have advantages.Our initial clinical confirmed that the method of Huo Xue Tong Jiang treating YuXueZuLuo of RE has remarkable curative effect,animal experiments found that:it can quickly come to repair the esophageal mucosa by adjusting the related gastrointestinal hormones and neurotransmitters level, increasing the tension of LES ，improving mucosal blood flow. But the mucosa repair mechanism is not clear now.Accordingly we proposed these hypotheses: the method of Huo Xue Tong Jiang can cure RE on the basis of regulating multitarget and multistrata of complic pathogenesis, and its role of mucous membrane injury repair is one of the important mechanisms of curing RE. With the research of early days,this item will centere on the change of Epithelial barrier, immunity, inflammatory mediators, signal transmission and proteomics to approach the effects of cell spaces, mast cell , TNF-α,IL-6, p38MAPK Signal pathway, function proteomics of LES cell of mucous membrane of esophagus of model rats. With the research above all,we can deeply reveal the effect target and the mucosa repair mechanism, offer scientific foundations to the method Huo Xue Tong Jiang of curing RE

反流性食管炎(RE)为消化系统常见病，发病机制复杂，西药效果局限，病情易反复，为难治病种。祖国医学治疗RE，在缓解症状，降低复发率，减少毒副作用方面均具优势。我们前期临床研究证实活血通降法治疗RE瘀血阻络证疗效显著，进行动物实验发现：其可调节相关胃肠激素及神经递质水平，提高LES张力，改善粘膜血流，迅速修复食管病损黏膜，但其黏膜修复机制尚不明确。据此我们提出假说：本法治疗RE可能是针对其复杂的发病机制，多靶点、多层次的进行调节实现的，而对粘膜损伤的修复作用是其治疗RE的重要机制之一。本申请项目将结合前期研究工作，围绕黏膜损伤修复所涉及的上皮屏障、免疫、炎性介质、信号转导及蛋白组学变化，探讨本法对RE模型大鼠食管粘膜细胞间隙、肥大细胞、TNF-α、IL-6、p38MAPK信号通路、下食管括约肌细胞功能蛋白组学的影响，进一步揭示其作用靶点和黏膜修复作用的相关机制，为本法治疗RE提供科学依据

反流性食管炎（RE）为消化系统常见病，发病机制复杂，西药效果局限，病情易反复，为难治病种。祖国医学治疗RE，在缓解症状，降低复发率，减少毒副作用方面均具优势。课题组前期临床研究证实活血通降法治疗瘀血阻络证RE安全有效，前期动物实验表明其作用可能与调节胃肠激素及神经递质，影响胃肠动力及黏膜保护作用相关，但具体机制不明确。本研究旨在通过动物实验，进一步围绕黏膜损伤修复所涉及的上皮屏障、免疫、炎性介质、信号转导及功能蛋白组学变化，探讨活血通降法对RE模型大鼠食管黏膜细胞间隙、肥大细胞、TNF-α、IL-6、p38MAPK信号通路、下食管括约肌细胞功能蛋白组学的影响，进一步阐明中药作用机制。结果显示：活血通降法可提高RE模型大鼠黏膜愈合率，降低黏膜MC数目及脱颗粒率，加强食管黏膜细胞紧密连接；同时其可明显降低RE模型大鼠TNF-α、IL-6水平及食管黏膜细胞p38MAPK活性和5-HT水平；蛋白组学示RE有11种差异蛋白表达：F1M614、F1LM84、A法A0G2JU77、A0A0G2K0W9、P62907、P61314、P19945、Q5BJP2、G3V7Q6、P62282、D3ZSB7，其中Q5BJP2、G3V7Q6、P62282、D3ZSB7；其中调控蛋白4个。实验证实：在食管黏膜屏障修复方面，该制剂粘稠，可有效吸附于食管黏膜表面，改善食管下段黏膜组织炎症，加强细胞紧密连接，改善黏膜屏障。在调节食管动力学方面，该中药通过降低食管炎组织中5-HT的表达水平，使5-HT受体后效应逐步恢复至正常组水平，从而使食管动力障碍得到解除，食管清除能力得到恢复，抑制食管反流。在改善免疫炎性指标方面，中药可降低血清 L-6、TNF-α表达水平，下调p38MAPK信号转导通路，降低食管黏膜单位黏膜MC数量及脱颗粒率，从而减缓炎症反应。从蛋白组学来说，找到4种调控蛋白（Q5BJP2、G3V7Q6、P62282、D3ZSB7），通过KEGG分析发现其参与NF-kB通路的调控，在RE的发病过程及活血通降法的作用机制中可能发挥了关键性作用。以上作用与中药浓度、治疗时间成正相关。综上，活血通降法对瘀血阻络证RE的治疗作用是通过对上皮屏障、免疫、炎性介质、信号转导及功能蛋白的调节相关，黏膜损伤的修复作用是该法治疗RE的重要机制之一。