抗癌民族药物暗消藤活性组分及其作用机制研究

我国西南地区蕴藏着丰富的特有药用资源，经过三年多的前期研究，发现民族药物-暗消藤是一种潜在的抗肺癌药物资源，利用体外活性追踪发现了一个活性强于顺铂的活性组分群，利用裸鼠-人肺腺癌皮下移植瘤模型，采用国际通用的抗癌药物作用评价指标，考察了该活性组分群的体内抗人肺癌活性，结果表明，在减缓肿瘤生长速度方面，其活性强于顺铂和紫杉醇。对其的初步化学成分研究表明，我国产的暗消藤与文献报道的暗消藤活性组分存在着较大差异，因而拟进行详尽的活性组分群的化学成分研究，已经分离到了10个化合物，对其进行的初步活性筛选发现了几个活性强于活性组分群和紫杉醇的化合物。下一步研究还将进行化合物的分离，阐释活性成分的构效关系，并对其进行结构修饰，发现抗癌先导化合物；并对该先导化合物进行分子水平上的抗癌作用机制研究，以阐明民族药物暗消藤抗肺癌活性成分化学组成及其作用机制，为开发新药奠定基础。

暗消藤为萝藦科暗消藤（Streptocaulon juventas）的干燥根。本研究对其抗癌活性部位的化学成分及抗肿瘤作用机制进行了研究，主要取得了如下研究成果：.1. 利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱，MPLC，制备HPLC等分离手段，分离得到57个化合物，通过光谱色谱手段鉴定其结构，包括强心苷类化合物48个，香豆素类化合物3个，甾体类化合物2个，其他类化合物4个，其中13个为新化合物，18个为属内首分，5个为种内首分。采用人肺腺癌A549和PC-9细胞，对化学成分的抗癌活性测试，发现一些成分抗癌活性较强的抗癌先导化合物并总结了强心苷类成分的构效关系。.2. 对活性最强的化合物ATX6的微生物转化过程进行了研究，发现以蓝色犁头霉，燕麦镰孢, 密丛毛霉等17种菌的作用下，ATX6均可以发生脱糖反应。.3. 对活性最强的化合物（AXT6）的抗肿瘤机制进行了研究，发现其对A549细胞生长抑制呈明显的时间和剂量依赖性，作用强度强于紫杉醇，且其对人外周血单核细胞（hPBMC）无明显细胞毒作用。AXT6为Na+/K+-ATPase抑制剂，可诱导A549细胞发生凋亡及G2/M 周期阻滞，死亡受体途径、caspase-9 非依赖的线粒体途径、CyclinB1、Cdc2、ERK1/2及ROS 参与了上述过程。MDC 染色后经荧光显微镜观察及流式细胞术检测发现，AXT6 作用后细胞自噬相关指标均呈阴性，且自噬特异性抑制剂3MA 对细胞增殖抑制亦无显著影响，提示自噬在AXT6 诱导的细胞增殖抑制中不发挥明显作用。.4. 本研究成果发表SCI论文2篇（已录用），申请国家专利1项，国际专利1项，进行国际大会报告3次，国内大会报告1次，发表国内会议论文2篇，获得第十一届全国中药和天然药物学术研讨会青年学者优秀学术报告奖二等奖及辽宁省自然科学学术成果二等奖，培养博士生4人（毕业1人），硕士生5人（毕业4人），完成自然基金的计划内容。