初探他汀通过CXCR4通路调控炎症反应与血管生成治疗慢性硬膜下血肿及其分子机制

Chronic subdural hematoma (CSDH) prefers to occur in the elderly, easy to relapse, and difficult to cure, the efficacy is not satisfied. It is confirmed previously that CSDH local regions existed inflammatory reaction and angiogenesis, while the chemokine CXCR4-SDF-1、CXCR3-CXCL9/10and atorvastatin can regulate the inflammatory response and angiogenesis. It has been demonstrated that the low-dose atorvastatin can promote the absorption both of ecchymoma in mouse models and some CSDH patients. Thereby, we hypothesis that low-dose atorvastatin promotes the absorption of CSDH by regulating the inflammatory reaction and angiogenesis mediated by CXCR4-SDF-1、CXCR3-CXCL9/10 factors. Based on the pre-established CSDH animal models and endothelial progenitor cells in vitro models, we applied antagonist to observe the effect of different doses of atorvastatin on the CSDH absorption, chemokines, inflammatory factors and angiogenic changes block or cDNA transfection technology to enhance the expression of chemokines, then. Furthermore, by recruiting the CSDH volunteers with oral atorvastatin treatment, we can initially identify the signal transduction pathway involved in the chemokine regulation of the inflammatory response and angiogenesis in the atorvastatin treatment. Our studies will provide a theoretical basis for the formation of the new strategy of statin in treatment of CSDH.

慢性硬膜下血肿（CSDH）好发于老年人，易复发，难治愈，疗效未满意。此前已明确CSDH存在炎性反应及血管生成，而趋化因子CXCR4-SDF-1、CXCR3-CXCL9/10和阿托伐他汀均可调控炎性反应与血管生成。课题组前期应用低剂量阿托伐他汀促进小鼠皮下血肿吸收并治愈数例CSDH患者。我们假设低剂量阿托伐他汀通过调控CXCR4-SDF-1、CXCR3-CXCL9/10介导的炎性反应和血管生成促进CSDH吸收。拟在前期已经建立的CSDH动物模型和内皮祖细胞体外培养模型基础上，观察不同剂量他汀对CSDH吸收以及趋化因子、炎性相关和血管生成相关因子变化的影响；应用拮抗剂分别阻断趋化因子表达和抑制血管生成后，观察他汀治疗对上述指标的影响。招募CSDH志愿者口服他汀治疗。初步确定炎性反应和血管生成在他汀调控趋化因子治疗CSDH中的作用机制及其对疗效影响，为形成和优化他汀治疗CSDH新策略提供理论依据。

背景: 慢性硬膜下血肿（CSDH）是继发性颅脑损伤的主要类型，目前外科引流治疗方式并发症、致残率与死亡率不低，因多年来囿于动物模型的局限性，其发病机制及疗法的研究并未见实质性进展。趋化因子受体4（CXCR4）是体内参与炎症反应、血管生成等多种病生理过程的重要调节分子。本课题利用更能模拟人体CSDH发病时程的大鼠模型及临床CSDH病人标本的检测，深入研究CSDH发病机制及CXCR4的调控，结合观察临床CSDH病人标本中与炎症、血管生成密切相关的Treg、EPC变化及阿托伐他汀对血肿吸收的影响，为探索促进血肿吸收、疾病康复的有效药物提供科学依据。.主要内容：含基础及临床研究两部分。基础：探讨CSDH中血管生成、炎症反应及信号蛋白CXCR4的调控。包括：建立大鼠CSDH模型，分为假手术、CSDH及CXCR4特异性抑制剂AMD3100组，检测炎症反应及血管生成相关因子、细胞的变化及CXCR4在其中的调节功能，观察阿托伐他汀对血肿吸收的影响及相关机制。临床：探讨CSDH发病与Treg、EPC等的关系。募集临床CSDH患者及健康志愿者，记录患者血肿体积、神经功能及血Treg及EPC水平，研究Treg、EPC与血肿体积、神经功能间关系。.结果：1.成功制备了血肿超24天的CSDH大鼠模型。2.MRI及脑片HE染色示血肿体积在第3天达峰值后渐小，大鼠神经功能下降，阻断CXCR4致血肿吸收延迟，神经功能更差。3.CSDH促炎因子IL-6/8及TNF-α水平升高，阻断CXCR4其升高更明显，其水平与血肿体积及神经功能减退程度呈正相关；抗炎因子IL-10/13升高，阻断CXCR4后下降，IL-10/13与上述二者呈负相关。4.CSDH中EPC先降后升，阻断CXCR4后EPC下降；Treg比例亦先降后升，阻断CXCR4后减少。Treg及EPC水平与血肿体积、神经功能减退程度呈负相关。5.CSDH中vWF、CXCR4水平逐渐升高，阻断CXCR4致二者下降。6.阿托伐他汀可激活CXCR4表达，并促血肿吸收及神经功能恢复。7.CSDH患者术前Treg 与EPC水平下降，术后逐渐升高，二者水平与患者血肿体积及神经功能下降程度呈负相关。.成果意义：CXCR4 可能通过调节细胞及因子途径参与CSDH炎症反应及血管生成，阿托伐他汀可通过激活该通路促进CSDH患者血肿吸收及神经功能改善。