miR-30a在调控自噬通路介导的胃肠间质瘤细胞伊马替尼耐药性中的作用及机制研究

Imatinib (IM) has revolutionized the therapeutic effect for gastrointestinal stromal tumors (GISTs) patients; however, clinical acquired resistance to IM hinders the implementation of IM on GISTs patients and the underlying mechanism of GISTs resistance on IM is still unclear. Our previous study showed that IM induced autophagy in GISTs cells and inhibition of autophagy obviously enhanced the cytotoxicity of IM; furthermore, we found that IM induced down-regulation of miR-30a in IM-resistance GISTs cells and the expression of potential target of miR-30a, Beclin-1 which is the important gene in mediating the equilibrium of autophagy and apoptosis, was obviously up-regulated. These results provided us an indication that the disruption of the balance of autophagy and apoptosis may response for GISTs cell resistance on IM. Based on this indication, this program will explore the role of the balance of IM-induced autophagy and apoptosis on GISTs resistance to IM and how miR-30a regulates this balance in vivo and in vitro by various molecular biology experiments. The results of this study will provide not only a new theoretical basis but also a therapeutic target on overcoming the GISTs resistance to IM in clinic.

伊马替尼的出现改善了胃肠间质瘤（GIST）病人的预后，然而临床应用发现GIST可以对伊马替尼（IM）产生获得性耐药，其中的机制并不清楚。我们的前期研究表明，IM可以导致GIST细胞发生自噬，抑制自噬可以显著增强IM对GIST细胞的杀伤作用；进一步探讨机制，发现IM耐药GIST细胞株在IM作用后细胞内的miR-30a显著下调，并且miR-30a的可能靶点Beclin-1表达显著升高，而后者是调节细胞凋亡与自噬平衡的关键基因。提示我们凋亡与自噬平衡改变可能是GIST细胞耐IM的重要原因。本项目拟以细胞自噬介导耐药为切入点，应用多种分子生物学技术，结合体内外实验验证miR-30a在IM诱导的GIST细胞自噬凋亡平衡中的作用及可能的机制；以了解自噬凋亡平衡在IM耐药中的作用，为GIST细胞耐药机制研究提供崭新思路，并有望为临床GIST治疗克服伊马替尼耐药现状提供新的靶点。

胃肠道间质瘤（GIST）是肉瘤中最普遍的一种，其驱动基因突变主要发生在受体酪氨酸激酶（KIT）和血小板衍生的生长因子受体α（PDGFRA）上。然而，对伊马替尼（IM）的耐药性的必然发展不能完全归因于继发性驱动基因突变。在这项研究中，我们调查了microRNA-30a在胃肠道间质瘤细胞中对IM体内和体外药物敏感性的作用。在GIST-T1细胞中检测到miR-30a的表达更高，它对IM的敏感性也高于GIST-882细胞。 IM作用后还降低了miR-30a的水平，表明miR-30a在GIST 可能再IM耐药中发挥作用。随后，miR-30a被证实是一种IM敏化剂，其机制被认为参与了细胞自噬的调控。在IM处理的GIST细胞中，miR-30a与自噬的相互作用被发现与beclin-1有关。Beclin-1的下调可以增加GIST细胞系的IM敏感性。最后，证实了miR-30a可以增强小鼠肿瘤模型中GIST细胞对IM敏感性。我们的研究为miR-30a在胃肠道间质瘤患者继发性IM耐药发生中的可能作用提供了证据，这表明miR-30a是有望成为克服这种耐药的靶点。