JAK/STAT3信号通路与利妥昔单抗耐药的相关性研究

利妥昔单抗（Rituximab）显著改善了弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的疗效，但是仍有30%～40%的患者无效：如何预测耐药患者并克服利妥昔单抗耐药，是目前 DLBCL 临床治疗中面临的主要问题。体外研究发现：JAK/STAT3信号通路是利妥昔单抗的作用机制之一，该途径与DLBCL细胞对利妥昔单抗耐药是否相关有待进一步研究。我们对82例接受利妥昔单抗+CHOP化疗的DLBCL患者的肿瘤组织检测发现STAT3磷酸化状态及其下游某些靶基因异常高表达与利妥昔单抗耐药相关。在此基础上，本研究拟通过检测病理组织和利妥昔单抗敏感及耐药DLBCL细胞系中STAT3及其磷酸化状态、靶基因的表达情况，分析JAK/STAT3通路与利妥昔单抗耐药的相关性，并拟在动物模型中通过抑制JAK/STAT3通路相关靶点加以验证，为了解利妥昔单抗的耐药机制及逆转耐药提供基础研究依据。

本课题已经发表SCI文章2篇，影响因子分别为2.93和3.99，另有两篇SCI文章评审中。主要结果如下：.检测166例利妥昔单抗（R）治疗弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者STAT3表达及磷酸化状态及外周血标本STAT3编码区rs6503695、rs2293152的基因多态性，发现：DLBCL胞核和胞浆中均表达STAT3，高表达率20%～30%。STAT3在non-GCB中表达率明显高于GCB组，核表达在两组间存在统计学差异。STAT3核高表达和IPI相关，与B症状、发病年龄、临床分期等无相关性，胞浆高表达与上述因素无相关。STAT3表达和一线治疗CR率、有效率、TTP无明确相关性。胞浆和胞核高表达均提示预后不良，是独立预后因素。R联合化疗较单纯化疗提高CR率，明显延长TTP时间，STAT3高表达明显影响R疗效，STAT3可能是导致R疗效不佳的重要原因。.提取外周血DNA，采用PCR技术对STAT3基因编码区rs6503695、rs2293152的基因片段扩增并基因测序，结果：（1） rs6503659在non-GCB亚组结内病灶与基因型相关，在GCB亚组中ECOG、ß微球蛋白与基因型相关。（2）rs2293152在non-GCB亚组中BCL2、血沉、ß微球蛋白与基因型相关，在GCB亚组中性别与基因型相关；（3）STAT3的SNP均不是本组患者的预后因素；（4）rs2293152纯合子基因型（CC+GG）患者接受R联合化疗的CR率有优势，远期疗效无优势。.采用PCR技术对CD20外显子1和2及C1qA外显子2目的片段扩增并基因测序，结果：（1）中国DLBCL患者C1qA 外显子2存在SNP，C1qA【276】 基因型与西方人种有差异；C1qA【276】 基因型与DLBCL临床特征及分子分型间无相关；C1qA【276】 纯合子AA型患者R联合化疗的近期与远期疗效均有优势。（2）DLBCL患者CD外显子1、2存在SNP，CD20 外显子2【216】基因型与西方人种无差异；CD20 外显子2【216】 基因型与DLBCL临床特征及分子分型无相关，也非DLBCL预后因素；CD20外显子2【216】 纯合子CC型患者接受R联合化疗近期疗效可能更高，远期疗效与携带等位基因T组无明显差异；同时具两种优势基因型的患者近、远期疗效更佳。