大麦黄矮病毒核酶的构建及应用研究
基本信息
结项摘要
以大麦黄矮病毒GPV株系为研究对象，分别在其外壳蛋白（CP）和复制酶基因中选择合适的剪切位点，合成并克隆了相应的核酶基因，同时分别将CP和复制酶基因进行了克隆。利用体外转录体系分别将核酶基因及其相应的底物基因转录成RNA后，按比例混合，在20mMMgcl2 50mMTris.HCl.pH7.4条件下，30℃,70℃，50℃分别反应1-2小时，结果经19次试验均不成功。对cp核酶二级结构分析，发现其两端存在AATT结构可形成二级结构。CP的核酶切点附近也为二级结构密集区，故影响了核酶的剪切效果。复制酶核酶虽设计合理，但序列分析发现其中存在一段错误序列，导致核酶两端存在长达16个碱基的互补序列，形成稳定的二级结构，使其无法对底物进行结合和剪切。
项目摘要
项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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