CTE-RHA复合核酶的构建及抑制HCVRNA复制和蛋白表达的研究

构建人源性tRNA启动子驱动的CTE-RHA复合核酶的真核表达载体及人源tRNA启动子驱动的普通核酶的真核表达载体，利用HCVRNA复制子细胞模型及HCV血清感染HepG2细胞模型研究和比较两种真核载体表达的核酶在细胞内抑制HCVRNA复制和蛋白表达的作用；构建CTE-RHA核酶和普通核酶的T7RNA多聚酶启动子驱动的原核载体，观察两者在试管内切割HCVRNA的效率，以及外源性RHA对切割效率的影响。从细胞内和试管内证明CTE介导的核酶与RHA形成复合体，RHA能将复杂的HCVRNA空间构型变成线性结构（解旋作用），使核酶容易与其切割位点结合发挥作用。CTE-RHA核酶复合体作为新一代核酶具有较普通核酶明显强大切割效率，且其作用不受底物RNA二级或三级结构等复杂空间构型的限制，成为名副其实的无处不及的新型核酶。它的研究成功无疑对研究HCV的致病机理及抗HCV的治疗起到巨大的推动作用。