MDSCs诱导的免疫抑制微环境促进子宫内膜异位症发生发展的机制研究

Endometriosis is a common disease for women. Studies showed that the pathogenesis of endometriosis is related to an immunosuppressive microenvironment. MDSCs represent an important population of immunosuppressive cells, which may take part in that microenvironment. Our previous studies showed a tendency of accumulations of MDSCs and Tregs, as well as reduction of CD8 T cells in the peritoneal fluid of III-IV EMT patients. These results indicated that MDSCs play an important role in the pathogenesis of endometriosis. Thus, our project aims to: 1) detect I-IV EMT patients' MDSCs and their related immunological cells and factors, to confirm the existence of MDSCs and their induced immunosuppression in EMT patients; 2) incubate MDSCs and T cells from EMT patients, to study the molecular pathway of MDSCs; 3) continue to study the molecular pathway of MDSCs using EMT mice. Therefore, our study will provide new methods for the diagnosis and treatment of endometriosis.

子宫内膜异位症（EMT）是育龄期妇女常见病。研究表明，其发病与免疫抑制微环境有重要关系，而骨髓来源的免疫抑制细胞（MDSCs）作为一类重要的免疫抑制细胞有可能参与其中。申请者前期发现在III-IV期EMT患者腹腔积液中存在MDSCs和T调制细胞（Tregs）聚集现象，同时伴有CD8+T细胞减少趋势。这些结果提示，MDSCs和其诱导的免疫抑制在EMT发生发展中起到重要作用。但MDSCs诱导的免疫抑制确切分子机制有待进一步确定，因此，本项目拟开展：（1）检测I-IV期EMT患者外周血和腹腔积液标本中MDSCs及相关的免疫细胞和因子，进一步确认EMT患者体内存在MDSCs诱导的免疫抑制微环境；（2）共培养来源于患者的MDSCs和T细胞，探索MDSCs免疫抑制分子机制；（3）应用EMT小鼠模型，深入探索MDSCs诱导的免疫抑制促进EMT发生发展分子机制，为EMT诊断和治疗提供新的思路和方法。

研究背景 .子宫内膜异位症（EMT）是育龄期妇女常见病。研究表明，其发病与免疫抑制微环境有重要关系，而骨髓来源的免疫抑制细胞（MDSCs）作为一类重要的免疫抑制细胞有可能参与其中。.主要研究内容和重要结果.（1）本研究检测EMT 患者及对照组外周血及腹腔积液中MDSCs、T 细胞、Tregs 和各种细胞炎性因子在各组的外周血和腹腔积液含量及功能，确认EMT患者体内存在MDSCs 诱导的免疫抑制微环境。.（2）本研究在雌性小鼠身上成功构建了子宫内膜异位症模型，分为三组：正常小鼠组和两组子宫内膜异位症小鼠组。实验组分别给予生理盐水和notch信号通路抑制剂DAPT饲养4周，后杀鼠留取小鼠子宫组织，异位内膜组织，血液和腹腔灌洗液。采用荧光酶标仪检测各组动物腹腔灌洗液及子宫内膜组织中的氧自由基的情况，还采用生化分析在腹腔灌洗液和子宫内膜组织中检测了notch信号通路中的四种酶的活性，另外还利用RT-PCR技术检测了各组动物子宫内膜组织中四种notch通路相关分子的mRNA水平，同时还通过流式细胞仪检测了子宫内膜组织中的MDSC和T细胞的水平以及免疫荧光技术检测了子宫内膜组织中白细胞的情况。通过实验我们发现使用notch通路抑制剂DAPT可以使组织中的MDSCs和ROS减少，可以推断通过抑制notch信号通路可阻止子宫内膜异位症的进一步发展。.科学意义.本研究揭示了参与免疫抑制的MDSCs 在EMT 患者腹腔局部及全身免疫环境中有聚集现象，并在EMT 发生发展中起到一定程度作用。然后,通过小鼠实验深入探索了MDSCs诱导的免疫抑制促进EMT发生发展分子机制，为EMT诊断和治疗提供新的思路和方法。