调控神经细胞自体吞噬在SAH后早期脑损伤中的作用研究

蛛网膜下腔出血（SAH）造成的早期脑损伤是患者预后不良的主要因素之一，各种形式的神经细胞死亡是早期脑损伤的主要病理变化，包括自噬性细胞死亡、凋亡及坏死。自噬是细胞在能量供应不足情况下产生的一种病理反应，具有造成细胞死亡和维持存活的双重作用。本研究探讨调控自噬在SAH后脑损伤中的作用。颈内动脉穿刺法制作大鼠SAH模型，观察自噬的时间特征与细胞定位；调节自噬药物及Atg7-siRNA脑室内注射调控自噬程度，研究增强或抑制自噬后脑损伤的程度及对神经细胞凋亡的作用；同时探讨SAH后自噬激活的相关信号通路机制。本研究试图阐明自噬在SAH后脑损伤中的作用及相关机理，为治疗SAH后早期脑损伤奠定基础。

颅内动脉瘤破裂引起的自发性蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）是神经外科常见的急症之一，发病率仅次于脑梗死和脑出血。SAH后颅内压增高、脑灌注下降、脑缺血缺氧等一系列因素造成的早期脑损伤（early brain injury, EBI）是决定患者预后的重要因素。EBI的重要病理变化是神经元细胞发生的凋亡，造成脑组织神经元的死亡或缺失，从而导致一系列的神经功能障碍。自噬（autophagy）是一种在生理和病理条件下均可发生的现象，自噬是一把“双刃剑”，一定程度的自噬具有清除衰老的细胞器和保护细胞渡过能量缺乏、缺氧等不利条件的作用，是维持细胞存活的重要条件之一；而过度自噬则可造成细胞死亡。SAH后神经元发生自噬，但自噬在SAH后脑损伤中的作用尚不得而知。本课题在建立SAH模型的基础上，观察SAH后自噬发生的时间特点、细胞定位、自噬与凋亡的关系等；应用药物调控自噬，观察抑制或激活自噬后神经元凋亡的变化及早期脑损伤的情况；同时研究自噬相关信号通路在SAH后的调控情况。研究结果发现，SAH后自噬明显增强，在12、24小时均可检测到明显的自噬流；自噬主要发生于神经元细胞，而很少发生于神经胶质细胞等其他细胞；增强自噬具有抑制凋亡、减轻EBI的作用；而抑制SAH后自噬则使脑损伤加重。SAH后自噬相关的信号通路如Akt-GSK3通路以及AMPK通路等参与SAH后自噬的调控，并与凋亡的调控相关，可能是SAH后凋亡与自噬调控的关键节点。.本课题按照申请书的要求，完成了课题所涉及的实验，发表SCI收录论文1篇，获省级科技进步奖2项，培养硕士研究生4名，圆满完成了课题内容。