马链球菌马亚种持续性感染的分子免疫机制研究

Strangles that caused by Streptococcus equi subsp equi is one of important diseases that affect the rapid development of horse breeding industry in Xinjiang. Streptococcus equi has a feature of antimicrobial resistance cause persistance infection and immune evasion. Now sufficient knowledge is still lack about the mechanisms and immune effect of combination function of GAPDH, SrtA, SeM, EAG on the persistence infection of this bacteria. In this study two crucial adhesins GAPDH, SrtA and two key immune evasive factors SeM, EAG were choosed as research subjects, and the immune response characteristic and mechanism about how the these factors affect the persistent infection was investigated from molecular immune, humoral immune，cellular immune and mucosal immune. The objective of the study is to explore related immune mechanisms and deepen the persistence infection mechanisms of Streptococcus equi subsp. equi. Furthermore, this study will provide theoretical basis for us to screen and evaluate efficient immune target, to develop novel and highly performance vaccine and better immunization strategies in future.

马链球菌马亚种引起的马腺疫目前已成为制约新疆地区马产业快速发展的重要疾病之一。该菌具有对抗生素极易产生耐药性，持续感染及逃避免疫的特点，目前对该菌的持续性感染及其免疫机理仍缺乏足够的认识，严重制约了对该病的有效防治。本研究以该菌重要黏附分子GAPDH、SrtA和免疫逃避分子SeM、EAG为研究对象，通过分子免疫、体液免疫、细胞免疫、免疫病理等方法研究与探索马链球菌马亚种的不同黏附定植分子及免疫逃避分子如何通过单独和联合免疫应答过程影响该菌的持续性感染的发生，阐明相关的免疫机制，深化对马链球菌马亚种的持续性感染免疫机制的认识，进而为筛选评估高效的免疫靶标、开发马链球菌马亚种的新型高效疫苗和制订高效的免疫新策略提供重要理论依据。

马链球菌马亚种引起的马腺疫目前已成为制约新疆地区马产业快速发展的重要疾病之一，由于对该菌的持续性感染及免疫机理仍缺乏足够的认识，严重制约了对该病的有效防治。本研究以该菌重要黏附分子GAPDH、SrtA和免疫逃避分子SeM、EAG为研究对象，对其在该菌持续性感染过程中的免疫机制进行探索研究。本研究首次对马流产沙门菌两种不同鞭毛蛋白（FliC和FljB）进行表达与免疫特性分析，证明FljB在诱导关键免疫分子TLR4、TLR2、TCR及MHC-I的表达，抗体水平及免疫保护效果方面均优于FliC。为更好的认识SeM与该菌持续感染的关系，本研究利用FljB对免疫逃避进行干涉研究，构建与表达FljB-SeM蛋白，该融合蛋白可有效诱导IgG1及IgG2a类抗体，改善对小鼠的攻击保护，该融合蛋白可有效诱导小鼠及马产生特异性IL-4及IFN-γ。该结果表明基于Toll样受体5的免疫模式对该菌的持续感染具有良好的保护效果。此外，FljB-SeM免疫本体动物马后产生的特异抗体持续期可长达150d。以表达及纯化的SrtA、SeM及EAG 3种蛋白免疫小鼠，结果表明SrtA具有较强的免疫调节和诱导能力，其诱导的MHCⅠ、TCR、TLR2、TLR2及TLR4的表达水平显著高于其他两种蛋白，三种蛋白联合免疫可显著提高MHCⅠ及TLR3分子的表达水平，且可产生良好的保护效果。以纯化的EAG+SeM+GAPDH 免疫后，GAPDH分子可显著改善MHCⅠ、TCR及TLR4的表达水平，肝脏、脾脏及肺脏的荷菌量显著降低且保护效果好。这些结果表明EAG、SeM、GAPDH和SrtA的免疫可通过对不同细胞因子和免疫受体的调节影响该菌的持续性感染，成为有潜力的马腺疫新型高效疫苗的免疫靶标，FljB-SeM可为制订高效的免疫新策略提供重要技术基础。