异硫氰酸酯预防口腔黏膜恶变的机制研究

椰菜提取物异硫氰酸酯（BITC）抑制恶性肿瘤增殖，具有肿瘤特异性，但机制尚未明确，缺乏系统的动态研究。本研究采用分子生物学方法，从分子水平、体外细胞水平和体内动物水平，对BITC预防口腔黏膜癌变过程的作用和机制进行研究，分别探索：1） BITC 抗氧化性能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的相关性；2）BITC对舌癌细胞缺氧诱导因子-1 α及其下游基因的影响；3）BITC对动物体内口腔黏膜恶性转化过程中一系列增殖信号转导通路和生物学指标的作用。通过上述问题探索，阐明BITC抗氧化性能及其对舌鳞癌细胞增殖的影响，阐明BITC预防口腔黏膜恶变、微血管形成、肿瘤侵袭生长甚至出现转移的作用机制。本研究结果对利用椰菜提取物预防口腔黏膜癌前病变和鳞癌的发生、发展有重要现实意义，为开展口腔肿瘤化学预防研究提供了新思路。椰菜提取物取材方便、价格低廉、对正常组织无毒副作用，可长期使用，有望成为防癌战略的途径之一。

为研究椰菜提取物异硫氰酸酯（BITC）对舌鳞癌细胞增殖的作用，本研究采用分子生物学方法，从分子水平、体外细胞水平和体内动物水平，探索了BITC 抗氧化性能与抑制舌鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的相关性；初步探索了 BITC对舌癌细胞缺氧诱导因子-1 α（HIF-1α）及其下游基因血管内皮生长因子VEGF的影响； 探讨了BITC对动物体内舌鳞癌形成过程中抑瘤的作用及可能机制。结果发现BITC在体外抑制舌鳞癌细胞增殖和凋亡，并呈现出时间和浓度依赖性，BITC抑制细胞产生ROS，阻断抑制AKT、JNK磷酸化，可能与其阻止细胞增殖有关；BITC能抑制HIF-1α及VEGF活化，并呈现浓度和时间依赖性。另外，划痕实验表明，BITC作用下，细胞迁移减少，这是BITC阻断癌细胞发生转移的重要方式之一。动物体内实验也发现BITC 抑制动物体内舌癌细胞的成瘤作用。本研究的实验方法和内容基本按照计划执行，其中动物实验部分为了与体外部分更相关，对其进行了调整，研究了异硫氰酸酯预防舌鳞癌细胞裸鼠移植瘤生成的作用，取得了预期结果，本研究结果为项目申请者深入开展椰菜提取物阻断口腔黏膜癌变的研究提供了客观数据。本项目培养毕业了3名硕士研究生，在各级期刊已发表了4篇论文，另有论文3篇正在投稿中，加强了与国外实验室的合作，多次参加全国和国际学术会议，进一步提升了项目负责人和团队的科研能力。