miRNA223/1237调控胚胎着床的功能与机制研究

胚胎着床是在甾体激素调控下多种功能基因参与的复杂而精细的生理过程，但着床及着床障碍的分子机制尚不明确。因miRNA可在转录后水平调节女性生殖，使其成为研究胚胎着床的新热点。本实验室前期工作基础及国内外研究提示：Hsa-miR-223/Hsa-miR-1237可能通过靶基因LIF/ADAMTS1调控胚胎着床。本项目结合基因芯片、生物信息学模型，拟采用着床动物模型、宫腔内基因转染、RNAi技术和荧光酶报告基因等方法对miR223/1237在胚胎着床中的生物学功能及分子机制进行实验研究，从而为着床障碍及习惯性流产等疾病的病因学提供新的理论依据，并为寻找全新的基于miRNA的辅助生殖助孕方法提供新的思路，以期更好地应用于临床。

研究显示，微小RNA（miRNA）可以在转录后水平调节女性生殖系统的多种生物学进程。通过我们前期的miRNA芯片结果和国外的mRNA芯片数据进行比对，我们发现miR-223和LIF，IGF-1R；miR-1237和ADAMTS1，HOXA11这四个内膜容受性相关基因的3’ UTR存在碱基互补，提示miR-223和miR-1237可能通过调控这些基因从而影响胚胎着床。.本项目通过体外和体内实验对miR-223和miR-1237在胚胎着床中的作用及机制进行了研究。实验结果发现：1）miR-223和其预测靶基因LIF，IGF-1R以及miR-1237和其预测靶基因ADAMTS1， HOXA11在人类及小鼠的子宫内膜中均呈现出相反的表达趋势：即分泌期子宫内膜靶基因表达高而miRNA表达低，增生期相反；2）双荧光素酶检测显示miR-223可以和其预测靶基因的mRNA的3’ UTR端结合，而miR-1237不能和预测靶基因的mRNA的3’ UTR端结合；3）miR-223小鼠子宫内膜过表达可抑制LIF，IGF-1R的表达，并且抑制子宫内膜上胞饮突的形成，减少胚胎着床的数量；4）在细胞模型中，miR-223也同样降低子宫内膜上皮细胞中LIF和IGF-1R的表达，并在子宫内膜上皮细胞和滋养细胞球的共培养系统中显著降低滋养细胞球对上皮细胞的粘附率；5）miR-223抑制子宫内膜细胞增生。.综上所述，本项目首次证实了miR-223和靶基因LIF之间的调控关系，结果提示miR-223可能通过抑制子宫内膜容受性相关蛋白LIF和IGF-1R的表达和子宫内膜胞饮突的形成影响子宫内膜容受性，从而减少小鼠胚胎着床的数量。