调节涎腺功能的新因子脂联素在正常和舍格伦综合征涎腺中的作用及机制研究

脂联素是主要由白色脂肪细胞产生的脂肪细胞因子，在细胞能量代谢和炎症反应中发挥重要的调节作用。血浆脂联素降低参与代谢紊乱和心血管疾病的发生。近来文献报道和我们的预实验提示，涎腺可能是脂联素生成和作用的新靶点。本课题拟采用RT-PCR、Western Blot和免疫组化等方法观察正常人和小鼠涎腺脂联素及其受体表达和分布的特点；探讨脂联素在涎腺代谢和分泌中的作用和信号转导通路；以非肥胖糖尿病（nonobese diabetic, NOD）小鼠为舍格伦综合征的动物模型，观察腮腺和颌下腺中脂联素及其受体的动态变化，分析其与涎腺病变的关系；探讨原发性舍格伦综合征患者涎腺分泌功能损伤、病理改变、局部脂联素及其受体变化的关系。上述研究将有助于揭示脂联素作为调控涎腺功能的新因子的作用机制；明确脂联素及其信号转导通路在舍格伦综合征中的变化和病理生理意义，为阐明原发性舍格伦综合征的发病机制提供新的思路。

脂联素是一种重要的内源性保护因子，具有抗糖尿病、抗动脉硬化、调节免疫和炎症反应和心血管保护作用，但其在颌下腺中的表达及作用不明。本课题采用RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光的方法，证实大鼠和小鼠颌下腺存在脂联素和脂联素受体（AdipoR1/2）的表达，明确其分布的特点。在离体灌流的大鼠颌下腺，证实脂联素以腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）依赖的方式促进唾液分泌。经电子显微镜和跨上皮细胞电阻测定，证实脂联素以AMPK依赖的方式调节紧密连接的结构和功能；采用shRNA方法明确AdipoR1和AdipoR2均介导脂联素调控颌下腺分泌的作用。舍格伦综合症是一种自身免疫性疾病，以涎腺和泪腺的淋巴细胞浸润和分泌功能降低为主要特征。本研究以非肥胖糖尿病（nonobese diabetic, NOD）小鼠和培养的SMG-C6细胞为模型，在整体和细胞水平探讨脂联素在舍格伦综合征发生和发展中的作用。结果显示21周NOD小鼠血浆脂联素水平降低，但7、14和21周NOD小鼠颌下腺局部脂联素水平均较同周龄对照小鼠显著降低，p-AMPK、p-ERK1/2和p-p38MAPK水平降低；炎症因子IFN-γ及其下游分子STAT1的表达上调，细胞凋亡数和caspase 3表达升高。在离体培养的颌下腺腺泡细胞系SMG-C6，可见脂联素抑制IFNγ诱导的STAT1表达和细胞凋亡。预孵育脂联素中和抗体，IFNγ诱导的SMG-C6细胞凋亡加重。这些结果提示局部脂联素信号通路受损可能参与了颌下腺炎的发生和发展，脂联素降低可能通过增加细胞对炎症因子的敏感性加重颌下腺的损伤。本研究证实颌下腺是脂联素生成的新来源和作用靶点，并揭示其在颌下腺的生物学功能及在涎腺炎症中的病理生理意义，为研发以脂联素为靶点调控生理和疾病时颌下腺的分泌提供新的思路。目前已接受SCI论文2篇，发表英文综述和中文综述各1篇。