Tim-3/galectin-9 通路在甲状腺相关眼病发病机制中作用的研究

The incidence of thyroid associated ophthalmopathy （TAO）which can result in blindness in severe cases, is leading in orbital disease. However, for the incomprehension of its pathogenesis, no specific therapy is available. Nowadays, the helper T cell , especially the imbalance between Th1 and Th2 is thought to be highly involved in the pathogenesis. The infiltration of activated Th1 cells from circulation to orbital tissue triggers the disease. In the active stage, Th1 cell dominates in orbit tissue. When the balance of Th1/Th2 shifts towards Th2 cell, the beginning of inactive stage arrives. However, the mechanism for activation of Th1 in circulation and the shift of the balance remains unknown. T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3(Tim-3) is highly expressed on Th1 cell, but cannot be found on Th2 cell. When combined with its ligand（Galectin-9）, Tim-3 can lead to apoptosis and malfunction of Th1 cell. Thus, we presume its important role in onset and development of TAO. This program focus on the establishment of the T-Cell-Orbital-Fibroblast Coculture model, the expression and function state of Tim-3 on Th cell, as well as the influence of Tim-3 pathway on orbital fibroblasts. This is the first explore on the role of Tim-3 on the pathogenesis of TAO and it probably provides a new target for the treatment of the disease.

甲状腺相关眼病（TAO）患病率在眼眶疾病中居首，严重者可致盲，其发病机制未明，目前缺乏有效治疗方法。现认为辅助性T细胞（Th cell），尤其Th1/Th2平衡的破坏在发病机制中起重要作用。外周循环中Th1细胞浸润眼眶标志着疾病的启动。在TAO活动期，以Th1浸润为主，当浸润细胞逐渐向Th2转化时，疾病开始进入静止期。但循环中Th1的活化及Th1/Th2平衡向Th1转化的机制仍未阐明。T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白-3（Tim-3）在Th1上有较高水平表达，而不在Th2上表达。其与配体（Gal）结合可诱导Th1凋亡及功能障碍。由此推测，Tim-3在TAO的启动及发展中起重要作用。本研究拟建立Th细胞与眼眶成纤维细胞（OF）复合培养模型，分析Tim-3在Th细胞上表达与功能状况及该分子通路对OF增殖、分化、分泌功能的影响。探索了Tim-3在TAO发病机制中的作用，为寻找新的治疗靶点提供依据。

甲状腺相关眼病(TAO)是一种与自身免疫性甲状腺病相关的眼眶病变，为成人最常见的眼眶疾病。在疾病发生的早期和后期，CD4+T细胞亚群频率发生变化，可能对病情发展有直接影响。本研究旨在观察无眼病的Graves病 (GD) 患者和甲状腺相关眼病患者外周血中CD4+T细胞亚群频率的变化以及T辅助细胞亚群表面T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白3(TIM-3)表达情况，了解患者全身炎症反应状态，分析CD4+T细胞亚群频率发生变化的原因，以及与甲状腺相关眼病发病的关系。同时检测TAO患者外周血CD14+单核细胞表达Galectin-9水平的变化，与健康对照组进行比较，分析其与TAO 病情活动的关系。.无眼病的GD患者与TAO患者和健康对照相比，Th1、Th2、Th17细胞频率显著降低；TAO患者与健康对照者相比，Th1、Th2、Th17细胞频率差异无统计学意义；三组间Treg细胞频率无明显差异；在TAO患者，Treg细胞处于相对缺乏状态。在TAO炎症过程中Th1细胞起主导作用，而在GD患者，Th17细胞介导的炎症可能发挥了更为重要的作用。CD4+T细胞频率变化与GD患者是否会发生显著的眼眶病变有关。无眼病的GD患者与TAO患者相比，Th1、Th2、Th17细胞表达TIM-3分子水平显著升高；TAO患者与健康对照者相比，Th1、Th2、Th17细胞表达TIM-3分子水平差异无统计学意义；三组间Treg细胞表达TIM-3分子水平无明显差异；提示Th1、Th2、Th17细胞表达TIM-3分子水平变化可能与GD患者发生眼眶病变有关。Th1、Th2、Th17细胞频率与其表达TIM-3分子水平呈负相关，表明TIM-3分子对Th1、Th2、Th17细胞起抑制性作用。Treg细胞频率与TIM-3表达水平无明显相关关系。.外周血单核细胞表面表达 Galectin-9 分子，在TAO活动期，Galectin-9表达下降，TIM-3分子对T细胞活动的抑制作用减弱，可能TAO患者体内炎症活动增强、病情活动有关；而静止期TAO患者，Galectin-9分子表达水平回升到与健康人接近的水平，可能与T细胞炎症活动受到抑制有关。本研究认为，单核细胞表面分子Galectin-9 表达水平的变化，可能参与了TAO的发病过程。