识别肿瘤细胞表面特征蛋白质的分子印迹纳米微球的研制

以蛋白质为模板的分子印迹聚合物是当前分子印迹技术研究的热点。我们研究组创新性地引入了限长的辅助识别聚合物链 (assistant recognition polymer chains, ARPCs)，制备蛋白质印迹聚合物，大大提高了印迹聚合物识别的专一性，并成功地纯化了天然微量蛋白质。K．Shea 的研究组采用抗原表位印迹法，以蛋白质的部分肽片段为模板，制备蛋白质印迹聚合物膜。这些印迹聚合物膜用于分离蛋白质时，显示出对靶蛋白很好的特异性。本工作以肿瘤细胞特征的跨膜蛋白ErbB2表露部分肽片段为模板，借助本研究组前期工作的成果，利用同时带有羧酸基团和吡啶基团侧链的ARPCs，研究制备蛋白质印迹聚合纳米微球。该微球将用于识别肿瘤细胞特征性表达丰富的跨膜蛋白ErbB2，因而对肿瘤细胞的标记识别以及建立对肿瘤细胞的靶向给药体系具有重要的理论意义和应用前景。

ErbB2是酪氨酸激酶受体家族的成员，对调节正常细胞的生长和分化起着重要作用，然而，ErbB2的过度表达或下调可导致多种人类癌症的加速发展。基于此，我们选取并合成了ErbB2表露部分的一段多肽，并以固定在玻璃片上的这段多肽为模板, 以ARPCs为辅助单体合成荧光标记的分子印迹纳米球。然后从玻璃片上将分子印迹纳米球洗脱下来， 并用此印迹纳米球去识别PVDF膜上的ErbB2的多肽，表现出了很好的特异性识别能力。同时，我们还以克隆的蛋白质BiP 或 FKBP23为模板，以同样的ARPCs为辅助单体合成了分子印迹微球，并用此印迹微球去识别内质网体中的天然蛋白质，表现出了较高的识别能力。此外，我们用分子印迹微球取代抗体来研究BiP和FKBP23的特异性结合，发现使用印迹微球的实验结果同使用抗体的免疫沉淀实验的结果相一致，说明分子印迹聚合物微球可以代替抗体来识别天然蛋白质和研究蛋白质间的相互作用，这对识别肿瘤细胞的印迹聚合物体系的建立具有重要的理论意义。