Ly-6Chi单核细胞分化的调控及其致动脉粥样硬化机制的探讨

Atherosclerotic disease is a kind of life-threatening disease. Monocyte/macrophage is the core component of atherosclerotic lesion. The present studies have demonstrated that monocytes have heterogeneity; this phenomenon exists conservatively between mice and human. Our and other advanced studies have demonstrated that multiple risk factors of atherosclerosis accelerate atherosclerotic lesion through promoting the Ly-6Chi monocyte differentiation. However, how Ly-6Chi monocytes participate atherosclerosis and what its potential modulation mechanism for Ly-6Chi monocyte differentiation eagerly need further explorations. Our study aim to observe how different monocyte subset transmigrate to sub-endothelial layer and differentiate into macrophage; elucidate the different the abilities of different monocyte subset contributes to inflammation response and subendothelial transmigration; further explore the modulation mechanism of monocyte subset differentiation and try to find the possible intervention approach; finally, our study evaluate the relationship between monocyte subset and vulnerability of coronary atherosclerotic plaques in patients with coronary heart diseases, therefore expand new way for the prevention and treatment of atherosclerotic cardiovascular diseases.

动脉粥样硬化性疾病是目前危害人类健康的主要疾病，单核巨噬细胞是其病变的核心成分。目前研究显示单核细胞具有异质性，而且该现象普遍存在于鼠和人类。我们和他人最新研究证明动脉粥样硬化的多个危险因素可促进Ly-6Chi单核细胞亚群的分化、并与其加速动脉粥样硬化病变密切相关。但关于Ly-6Chi单核细胞亚群如何致动脉粥样硬化，及其分化的调控机制目前尚不清楚。本研究将利用动脉粥样硬化易感模型，探讨各单核细胞亚群在动脉壁内分化成巨噬细胞的能力；明确各单核细胞亚群参与炎症反应和进入动脉内皮下能力的区别；检测有关参与Ly-6Chi单核细胞亚群分化的调控机制、寻找可能的干预环节；并在人群中评估单核细胞亚群与冠状动脉粥样硬化斑块易损性的关系，为动脉粥样硬化性心血管疾病的防治开辟新的思路。

单核巨噬细胞是动脉粥样硬化病变的核心成分，晚近研究显示单核细胞具有异质性。我们和他人前期研究显示动脉粥样硬化的多个危险因素可促进Ly-6Chi单核细胞亚群的分化、且与其加速动脉粥样硬化病变密切相关。但有关Ly-6Chi单核细胞亚群如何致动脉粥样硬化及其分化的可能调控机制目前尚不清楚。.本项目建立EFGP BMLDLR-/-嵌和鼠，通过饮食干预构建高胆固醇血症并高同型半胱氨酸血症的动脉粥样硬化易感动物模型。经过8周的饮食干预，血浆Hcy水平中度升高并未显著加重动脉粥样硬化病变,但显著增加骨髓来源的Ly-6Chi衍生的单核巨噬细胞在动脉粥样硬化病变内聚集。进一步分析显示Hcy水平中度升高可显著增加骨髓源性和动脉组织内居留的Ly-6Chi单核细胞亚群在动脉粥样硬化病变处的聚集以及向巨噬细胞分化。.在离体探讨Ly-6Chi单核细胞参与动脉粥样硬化形成的可能机制。证实Ly-6Chi+mid单核细胞亚群合成分泌TNF-α、IL-6的能力显著强于Ly-6Clow单核细胞，证明Ly-6Chi+mid为炎症性单核细胞亚群。L-Hcy 显著增加单核细胞跨膜移行和跨内皮下移行能力。验证Ly-6Chi单核细胞触发机体炎症反应、刺激内皮细胞和选择性进入内皮下、形成巨噬细胞，促进动脉粥样硬化进程的理论。.进一步探索炎症性单核细胞亚群分化的可能调控机制。结果显示同型半胱氨酸（Hcy）可剂量依赖性的增加Ly-6Chi+mid炎症性单核细胞亚群中超氧阴离子的产生；普罗布考显著抑制L-Hcy所诱导的炎症性单核细胞亚群的分化，及其超氧阴离子的产生。普罗布考可显著抑制L-Hcy在单核细胞系所诱导的NADPH氧化酶活性的增强。.在临床上检测中国北方汉族人群中HHcy与冠心病的关系及其可能机制。共入选的住院700余例冠心病患者。结果显示HHcy在中国冠心病患者中广泛存在，且与其肾功能、心功能异常有关。.本研究证实炎症性单核细胞亚群可通过分泌炎症因子及诱导单核细胞向内皮下移行、和巨噬细胞分化等机制参与动脉粥样硬化病变的形成。普罗布考可通过抑制NADPH氧化酶活性、减少高Hcy所诱导的炎症性单核细胞亚群的分化及其超氧阴离子的产生。高同型半胱氨酸血症（HHcy）与中国人群冠心病的发病及严重程度有关。普罗布考可能为临床上HHcy所致炎症性单核细胞亚群分化的提供可能的干预途径。