转录因子HMBOX1对NK细胞发育分化的调控作用及其机制探讨

与T、B淋巴细胞相比, NK细胞发育分化的转录调控机制尚不明了。本研究拟在本实验室所发现的转录因子HMBOX1负向调控NK细胞功能基础上，深入研究HMBOX1对NK细胞发育分化的影响。拟利用自己建立的HMBOX1基因敲除小鼠，观察HMBOX1缺失对小鼠NK细胞体内发育、分化及其功能的影响；采用野生型和HMBOX1缺失小鼠相互之间的骨髓细胞过继转输，观察造血干细胞本身HMBOX1缺失或骨髓微环境HMBOX1缺失对NK细胞发育的不同作用；同时建立HMBOX1过表达及沉默载体，转染人造血干细胞，观察HMBOX1对人NK细胞体外发育分化的影响；拟以生物信息学的预测结果为基础，采用染色质免疫共沉淀-测序、凝胶迁移实验、荧光素酶报告实验等方法确定HMBOX1基因对NK细胞发育调控相关基因（E4BP4、E2A等）启动子活性的调控作用，阐明HMBOX1对NK细胞调控的确切基因位点及其分子机制。

HMBOX1是近年发现的转录因子。为了研究HMBOX1在NK细胞发育分化过程中的调控作用，我们首先检测了Hmbox1在小鼠不同淋巴细胞中的表达水平，获得了小鼠淋巴细胞Hmbox1表达谱。进而成功构建了Hmbox1过表达载体pEGFP-N1-Hmbox1及RNA沉默慢病毒载体，转染小鼠工程细胞获得了较高的转染效率，但转染小鼠原代NK细胞转染效率较低。为了便于深入研究HMBOX1的功能，我们建立了Hmbox1基因敲除小鼠和骨髓条件性敲除小鼠模型，并计划利用这一模型，分离不同分化阶段NK细胞，研究Hmbox1缺失与否对NK细胞发育分化的调控作用。本研究已发表国内核心期刊论文1篇，培养已毕业硕士研究生1名，正在培养博士研究生及博士后各1名。