甲醛诱发大鼠鼻腔癌的分子机理研究

我们已建立甲醛所致大鼠鼻腔鳞癌细胞系FAT7。本项目采用FAT7和标记DNA共转染细胞NIH3T3，经选择培养基筛选获取抗性克隆接种裸鼠致瘤。摘肿块提DNA以大鼠高度重复序列3B5为探针Southern杂交为阳性，证实裸鼠肿块系FAT7基因组中包含了转化活性序列，将肿块DNA进行二轮转染及3B5再杂交，得大小不等脓缩带，说明甲醛作用相关序列得到脓缩。用Ras基因家族及p53基因特异性引物对二轮肿块DNA进行PCR扩增，结果仅K-ras基因扩出了相应产物Southem杂交进一步证实其含K-ras基因序列，说明甲醛诱发的大鼠鼻腔鳞癌作用的相关序列为瘤基因K-ras。RT-PCR、测序及数据库对瘤基因K-ras进行同源比较，未发现其存在点突变，其活化方式还有待进一步研究。