含硒抗体酶的基因重构与表达

以氧化型和还原型谷胱苷肽为半抗原偶联BSA制备单克隆抗体，完成了两种杂交瘤细胞的建立及对应的单抗可变区基因的克隆及DNA序列测定与分析；对一个单链抗体基因进行了丝氨酸密码子突变成乳白密码子UGA、在3’UTR区加上人GPX硒代半胱氨酸掺入序列，在真核细胞中进行了表达硒代半胱氨酸的探索性实验。建立了两株可分泌抗氧化型和还原型谷胱苷肽甲酯单抗的杂交瘤细胞株5C9和3G5，其分泌的抗体经修饰后获得了酶活性，活性比兔肝GPX活性分别高2.6倍和3.8倍，两种抗体可变区基因符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征。在本实验条件下，在真核细胞中表达含乳白密码子的单链抗体效率较低，这可能与选择的寄主细胞及不同种属的SECIS有关，但还需进一步探索。