微囊藻毒素-LR分子印迹聚合物的制备及特性表征

微囊藻毒素-LR是WHO和我国饮用水卫生标准中的检测项目，微囊藻毒素也可在水生动植物中富集，通过食物链危害人体。水或食物中藻毒素含量低、干扰多，前期的研究发现，常规方法难以准确检测。本课题拟利用分子印迹这一被称为塑料抗体的高新技术，制备针对微囊藻毒素-LR的高特异性分子印迹聚合物。通过实验研究分子印迹聚合物的影响因素，优化制备工艺。并对其结合位点等作用机理进行研究，用不同的表征方法研究证实所得分子印迹聚合物的特异性等特性特征。进一步建立微囊藻毒素-LR的分子印迹检测方法，为水产品等食物中的微囊藻毒素-LR检测标准的建立提供参考，为微囊藻毒素-LR分子印迹聚合物工业化开发应用做基础性研究。

建立了微囊藻毒素（MC）的紫外分光光度（UV）、HPLC、LC-MS、LC-MS/MS检测方法。建立了节球藻毒素(NODLN)的免疫亲和层析柱-高效液相检测方法。采用量子化学计算模拟了微囊藻毒素-LR(MC-LR)与七种不同功能单体（丙烯酸，AA；丙烯酰胺，AM；甲基丙烯酸，MAA；甲基丙烯酰胺，MAM；甲基丙烯酸甲酯，MMA；4-乙烯基吡啶，4-VP；三氟甲基丙烯酸，TFMAA）的相互作用，结果显示能与MC-LR形成较稳定的相互作用的有AM、MAM、MAA和AA，而MAA与MC-LR的结合最稳定。采用量子化学计算选定了MC-LR与MAA的两个结合位点。以MC-LR为模板分子，MAA为功能单体，进行了分子印迹聚合物（MIP）合成，采用电子扫描显微镜对MIP进行了形貌特征观察分析。利用合成的MIP为填料装填高效液相柱，对其吸附和纯化MC-LR性能进行研究。利用合成的MIP为填料制备分子印迹固相萃取柱（MISPE），并建立MISPE-HPLC检测方法，利用该方法对加标MC-LR水样和实际湖水进行检测，结果表明方法对MC-LR的回收率为75.2-97.3%，而对MC-LF、MC-LW、MC-YR、MC-RR、NODLN的回收率均低于50%，说明采用该方法合成的MIP对MC-LR的识别优于其他藻毒素，能用于水样的净化和富集预处理。