基于"阳盛瞋,阴盛瞑"跷脉理论研究针刺对睡眠-觉醒周期影响及clock，per基因和蛋白表达调控机制

A large number of clinical trials have shown that acupuncture has good clinical curative effect on regulating qiaomai for insomnia. But by acupuncture regulating qiaomai for treatment of insomnia.its pathways and its inner mechanism research have not yet been clearly expressed, In view of acupuncture good effect on insomnia , based on "YangCheng chen, Yin cheng Ming" qiaomai theory research, the applicant proposes new hypothesis on Acupuncture effect on sleep-wake cycle and clock, per gene and protein expression regulation mechanism. To test this hypothesis, we will comprehensively analysize traditional Chinese medicine " YangCheng chen, Yin cheng Ming" qiaomai theory,With insomnia rat experimental model as the carrier, using qiaomai acupuncture reinforcing zhaohai and reducing shenmai methods ,stimulating insomnia rats, applying modern time biology dynamic observation methods, combining with molecular biological detection method, observing acupuncture on insomnia rats sleep - awakening period influence, taking clock per gene and protein expression as the breakthrough point, revealing traditional Chinese medicine theory qiaomai to sleep regulation mechanism. This study will provide theoretical and experimental evidence for acupuncture regulating qiaomai for sleep - awakening cycle, therefore it has the important practical significance and clinical research value.

大量临床研究表明针灸调理跷脉对失眠具有良好的临床疗效。但对针灸调理跷脉治疗失眠的作用途径及其内在机理的研究尚未被清楚阐述。鉴于针灸调理跷脉对失眠具有良好的作用，申请者提出了基于"阳盛瞋，阴盛瞑"跷脉理论研究针刺对睡眠觉醒周期影响及clock，per基因和蛋白表达调控机制新的假说。为了证实该假说，我们将在全面分析中医学"阳盛瞋，阴盛瞑"跷脉理论基础上, 以失眠大鼠实验模型为载体,采用跷脉补照海泻申脉针刺补泻手法刺激失眠大鼠，运用现代时间生物学的动态观测方法，结合分子生物学检测方法，观察针刺对失眠大鼠睡眠-觉醒周期的影响,并对clock，per基因和蛋白表达调控机制这一关键环节为切入点, 揭示中医学理论中跷脉对睡眠调控的机理。本研究将为针刺调理跷脉对睡眠-觉醒周期影响提供了理论和实验依据，因此具有重要的实际意义和临床研究价值。

睡眠是人体所必需的节律性生理现象，与人体健康息息相关。随着日益激烈的社会竞争和逐渐加重的生活压力，失眠已成为最常见的睡眠障碍。近年来，大量临床研究显示针刺跷脉治疗失眠疗效好、见效快，但对针灸调理跷脉治疗失眠的作用途径及其内在机理的研究尚未被清楚阐述。基于此，本课题提出了基于"阳盛瞋，阴盛瞑"跷脉理论针刺通过影响睡眠觉醒周期及clock，per基因和蛋白表达调控失眠的假说，以失眠大鼠实验模型为载体,采用跷脉补照海泻申脉针刺手法刺激失眠大鼠，运用现代时间生物学的动态观测方法，结合RT-PCR、Westblot、HPLC技术，观察针刺对失眠大鼠睡眠-觉醒周期的影响,并将clock，per基因和蛋白表达调控机制这一关键环节为切入点, 揭示中医学理论中跷脉对睡眠调控的机理。研究发现：失眠模型复制成功后，通过动物自发活动记录及节律分析系统和美国Clocklab数据采集分析系统观察可见，SD大鼠睡眠节律紊乱，表现为光照休息期活动量增加，睡眠时间显著减少，针刺后光照休息期活动量减少，睡眠时间显著增加。失眠模型复制成功后，SD大鼠Per1、Per2、Per3、Clock基因及蛋白表达显著下降，较空白组其差异有统计学意义（P<0.05），SCN内MT1 mRNA及外周血清中MT表达下降，较空白组其差异有统计学意义（P<0.05）。针刺跷脉后Per1、Per2、Per3、Clock基因和蛋白表达明显上升， SCN内MT1 mRNA及外周血清中MT表达亦恢复与正常SD大鼠一致水平，其与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.05），较空白组无统计学意义（P>0.05）。通过该数据我们可以得出结论：失眠的发生会造成昼夜节律的紊乱，且与昼夜节律相关基因及MT密切相关，而基于"阳盛瞋，阴盛瞑"跷脉理论的针刺，可以纠正这些相关因子的表达，恢复正常的昼夜节律，改善失眠情况。这提示，基于跷脉理论的针刺治疗失眠疗效显著，其内在机制可能与改善生物钟基因的表达有关。这对针灸传统理论的科学内涵进行了进一步的阐释，具有重要的科学价值。